Человеческий инсулиноподобный пептид 1 (GLP - 1) ELISA

　　Человеческий инсулиноподобный пептид 1 (GLP - 1) ELISAинструкция по эксплуатации

BS - 0203 - A Человеческий инсулиноподобный пептид 1 (GLP - 1) Набор ELISA 96T

BS - 0203 - B Человеческий инсулиноподобный пептид 1 (GLP - 1) Набор ELISA 48T

I. Принцип эксперимента

В этом наборе используются двойные антитело - заполнители для обнаружения уровня GLP - 1 в сыворотке крови человека, плазме крови или клеточной культуре. Основные шаги включают:

Пакет твердофазных антител очищается от моноклональных антител GLP - 1 предварительно завернутым в микропористые пластины.

Антиген - антитело связывает ‌: GLP - 1 в образце связывается с твердым антителом, а затем добавляется диантигенный комплекс, отмеченный пероксидазой хрена (HRP).

Цветовая реакция ‌: Добавьте цвет TMB в субстрат, после окончания кислоты на длине волны 450 нм измеряется поглощение, концентрация прямо пропорциональна глубине цвета ‌

II. Состав комплекта реагентов

Примечания к спецификациям компонентов

Предварительная упаковка с микропористой пластиной 12 отверстий × 8 с антителами против GLP - 1

Стандартная продукция 0,5 мл / бутылка замороженного сухого порошка, требуется повторное растворение

HRP Маркировка против 6 мл сохранения

Цветной субстрат (TMB) A жидкость 6 мл + B жидкость 6 мл в настоящее время

Конец жидкости 6мл 2М серная кислота

Для концентрированного моющего раствора 20 мл требуется разбавление 1: 20

Образец жидкости xishi 6 мл содержит стабилизатор

Примечание ‌: Компоненты различных брендов могут различаться, подробнее см. в конкретной инструкции.

III. Обработка образцов

1. Тип выборки

Сыворотка / плазма ‌‌: EDTA или гепарин антикоагулянт, центрифугирование для очистки.

Клеточная очистка: 1000 × g центрифуга 20 минут для удаления примесей.

Организационная симметрия ‌: центробежное очищение после крекинга.

2. Условия сохранения

Краткосрочный ‌: 2 - 8°C Сохранение 48 часов.

Долгосрочный ‌: замораживание при 20°C или - 80°C после раздельной сборки, чтобы избежать повторного замораживания и оттаивания.

3. Рекомендации по разбавлению

Обычный образец ‌: Рекомендуется разбавлять в 5 - 20 раз (например, взять образец 20 мкл + 180 мкл разбавленного раствора).

Высокая концентрация выборки ‌: Требуется предварительное экспериментальное определение кратности разбавления, максимальное разбавление 100 000 раз (метод трехэтапного разбавления).

IV. Оперативные шаги

Стандартная продукция ‌

Стандартные продукты для замораживания и сушки плюс 1 мл разбавленного раствора для повторного растворения, после смешивания в течение 10 минут.

Выполните серию разбавления (например, 8pmol / L → 4pmol / L →...→ 0.5pmol / L).

Добавить ‌

Стандартное отверстие: 50 мкл / отверстие.

Пробные отверстия: сначала добавьте 40 мкл разбавленного раствора, а затем 10 мкл образца (общее разбавление в 5 раз).

Пустые отверстия: без выборки и двойного сопротивления.

Инкубация

Инкубация при температуре 37°C 120 минут, стирка пластины 3 раза (1 минута на погружение).

Цвет и конец ‌

В каждом отверстии добавляется TMB - тонизирующая жидкость 100 мкл, а при температуре 37 ° C светозащитная инкубация длится 15 минут.

Добавьте 50 мкл жидкости для прекращения реакции и измерьте значение OD в течение 30 минут.

V. ПРИМЕЧАНИЯ

Образцы избегают ‌: образцы с растворенной кровью, высоким содержанием жира и образцы, содержащие NAN3 (ингибирование активности HRP).

Баланс реагента ‌: Используйте температурный баланс передней камеры в течение 20 минут, концентрированный промывочный раствор должен растворяться в кристаллизации водяной ванны 40°C.

Контроль качества ‌: Рекомендуется установить комплексное отверстие, стандартная кривая R² должна быть ≥ 0,95.

VI. Анализ результатов

Стандартная кривая ‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌‌8204

Расчет концентрации ‌: значения OD выборки заменяются кривыми уравнениями, умноженными на разжиженные множители.

Примечание: Вышеизложенное только для справки, а не в качестве фактических данных, эксперимент должен строго следовать инструкциям или консультироваться с учителем техники.

　　Человеческий инсулиноподобный пептид 1 (GLP - 1) ELISAТяньцзинь Беншэн всегда рассматривал контроль качества как жизнь предприятия и стремился к постоянному повышению конкурентоспособности предприятия. В своей деятельности компания всегда придерживается: соблюдать закон, строго соблюдать закон, относиться к себе снисходительно, осмелиться взять на себя дух предпринимательства в качестве стандарта, с отличным качеством и отличным обслуживанием для поддержания и расширения рынка, в большей степени удовлетворять потребности клиентов. Совокупный выигрыш с клиентами является нашей целью развития, Benseng, партнер, которому вы доверяете! Набор Бенсона