RNAsafe Высокоэффективные RNASE

Продукция компании предназначена только для научных исследований и не может быть использована для клинической диагностики!

Условия хранения: - 20°C Сохранить более полугода.

Презентация продукции:

RNAsafe содержит несколько специальных соединений, которые инактивируют РНК и эффективно удаляют РНК, которые могут присутствовать в различных растворах или реакционных буферах, тем самым предотвращая разложение РНК. РНК - суспензия может быть использована для получения РНК - суспензии и может быть добавлена в реакционные жидкости различных РНК (например, транскрипция in vitro, ретрансляция, RT - PCR, зондовая подготовка, молекулярная гибридизация, ядерная защита Ассай и т.д.). Активация возможного микрозагрязнения Rnase, поддержание стабильности РНК и получение лучших экспериментальных результатов.

Характеристики продукта:

Подходит для различных буферных жидкостей, включая системы Tris и MOPS, которые не могут быть обработаны DEPC.

Безопасно и удобно удалить небольшое количество РНАСЕ из раствора.

Обработанный раствор может быть переработан в любое время (60°C 10 - 20 мин) для удаления любого последующего загрязнения РНАСЕ, которое может произойти.

Без ущерба для активности ретровирусных ферментов, РНК - полимераз и термостойких ДНК - полимераз можно использовать для ретровирусных и экстракорпоральных транскрипционных реакций.

5. После обработки не требуется стерилизация под высоким давлением.

Инструкция по применению:

1. Изделие представляет собой концентрат 20×, разбавляющий 20×RNAsafe до рабочей концентрации 1× в общем растворе или реакционном буфере, подлежащем обработке. Например, в 95 мкл обрабатываемого раствора может быть добавлено 5 мкл RNAsafe.

2. Обработка при температуре 60°C 20 мин для деактивации РНАСЕ. После обработки RNAsafe раствор охлаждается до комнатной температуры. Обработанный раствор может быть переработан повторно (60°C 10 - 20 мин) для удаления возможного загрязнения РНК во время хранения. Раствор охлаждается до комнатной температуры, после чего добавляются чувствительные к высокой температуре ферменты, такие как ретровирусные ферменты.

ПЦРКакие реактивы и оборудование необходимы для реакции?

РеакторА.
шаблонДНКА.ПЦРШаблоны Требования к реагированиюДНКНапример, извлечение из клеток, тканей, кровиДНКИ т.д.; Ссылки:ПЦРРеакция двух цитат, соответственно, с шаблономДНККонкретные области, необходимые для расширения пары концов, также могут быть синтезированы какТАИспользование экстрактов в таких процессах, как клонирование;dNTPА.ПЦРВ реакции нужно четыре.dNTPВключает в себя дезоксиаденозин (dATPДеокситорагиновая кислота (dCTPДезоксидил (dGTPДезоксицитозиновая кислота (dTTP) для деления клеток,ДНКСинтез и другие биологические процессы, используемыеПЦРРасширенные шаблоныДНКРасширение и расширение цепи;ДНК ТакПолимеразы:ПЦРПолимеразы, необходимые для реакции, обычно используютсяТакЕсть и другие виды полимеразы, такие какПФУАФюзионИ так далее, для увеличенияДНКЦепь;Буфер ПЦРРаствор: ДаПЦРРеакция обладает буферным действием, регулирует реакциюpHГидротиосульфатыСДСМелкие молекулярные органические соединения, такие как формальдегид, могут усиливатьсяПЦРСпецифичность реакции, что повышает эффективность реакции; Ферментная система:ПЦРАмплификация часто включает в себя экспериментальные шаги, такие как рекомбинация, построение и секвенирование, и часто требует ферментативной операции.МАРК:Стандарт молекулярной массы, используемый для определенияДНКИнструмент размера фрагмента.ДНКОчищенный набор: для очисткиПЦРПродукты реакции;
Оборудование:
ПЦРПрибор: для управления температурой реакции, обеспеченияПЦРСтрогий контроль различных температурных звеньев при реакции; Электрическая ванна: для разделенияПЦРПродукты усиления; Экстрактор нуклеиновых кислот: полностью автоматическая экстракция нуклеиновых кислот из образцов тканей. Эти реактивы и оборудованиеПЦРВ молекулярной биологии все это возможно только на упорядоченной основе.ПЦРРеакция и получение точных результатов.

ПЦРСоответствующие фундаментальные эксперименты:

ПЦРОсновные этапы реакции Общая полимеразная цепная реакция20до35Каждый цикл состоит из следующих3Шаг:

I. Трансформация:

Использование высоких температур (93-98℃Включить двойную цепьДНКРазделение. При высокой температуре соединятся дваДНКВодородная связь цепи прерывается. Перед первым циклом обычно нагревают в течение длительного времени, чтобы обеспечить разделение шаблонов и экстрактов и существуют только в виде одной цепи. Время этого шага1 - 2Минуты, дальшеПЦРПрибор контролирует температуру в фазе цикла.

II. Отжиг или соединение,Комплексность:

вДНКПосле разделения двух цепочек температура снижается, так что экстракт может быть соединен с одной цепьюДНКВверх. Температура на этом этапе обычно ниже температуры плавления экстракта.5℃. Неправильная температура отжига может привести к тому, что экстракт не будет соединен с шаблоном или ошибочно соединен. Время этого шага1 - 2Минут.

III. Расширение:

ДНКПолимераза начинается с экстракта, который соединяется при охлажденииДНКЦепочки синтезируют взаимодополняющие цепочки. Температура на этом этапе зависит отДНКПолимераза. Время этого шага зависит от полимеразы и синтеза.ДНКДлина фрагмента. ТрадиционныеТакРасчетный синтез1000bp/минБолее новыеТбр(От термофильных бактерий.Бюльденбергемия) Договоренность40Секунда, коммерческие компании производят конвергентные полимеразы только околоОт 10 до 15Секунда.

ПЦРОптимизация условий реакции:

1Температура и время денатурации:

Шаблоны обеспеченияДНКЦепочка гарантирует всюПЦРРасширение ключа к успеху. нагревание90~95°C, 30~60sОпять сложныйДНКМолекулы также преобразуются в одноцепочечные. Высокая температура или длительность высокой температуры могут быть правильнымиТакФерментная активность иdNTPМолекулы наносят ущерб.

2Комплексная температура и времяА.

ПЦРРасширенная специфичность зависит от сочетания экстракта и шаблона во время комплексного процесса. Чем выше температура сложности, тем выше специфичность продукта. Чем ниже температура сложности, тем ниже специфичность продукта. По ссылке.ТМЗначение устанавливается конкретно.

3Температура и время удлиненияА.

Обычно находитсяТакоптимальная температура действия фермента70~75°CМежду ними. Меньше чем16Когда нуклеотиды, высокая температура удлинения не способствует соединению экстракта с шаблоном, может медленно нагреваться до70~75°C. Продолжительное время реакции может зависеть от длины фрагмента, подлежащего расширению, меньше1 кб, 1 минДостаточно; Больше чем1 кбТребуется длительное продление.ТакФерменты могут основываться1 кб/минДополнительное время. Здесь следует отметить, что слишком длительное продление может привести к неспецифическому расширению. Поэтому необходимо установить правильное время продления.

4Количество цикловА.

После выбора других параметров,ПЦРКоличество циклов зависит главным образом от шаблоновДНККонцентрация. Теоретически.20~25После второго цикла,ПЦРНакопление продукта может достигать максимума, и на практике из - за каждой стадии реакции производительность не может быть достигнута100%Таким образом, независимо от концентрации шаблона,20 - 30Это более разумное количество циклов. Чем больше циклов, тем больше неспецифическое расширение.

Продукция, которую компания продает: