TSKgel Protein A - 5PW хроматографическая колонка

TSKgel Protein A - 5PW хроматографическая колонка

Колонна хроматографии TSKgel Protein A - 5PW предназначена для быстрого разделения и точной количественной оценки нескольких антител. Моноклональные антитела захватываются и квазиидентифицируются из собранной клеточной питательной жидкости, и каждый поступательный анализ может быть выполнен менее чем за 2 минуты. Эта хроматографическая колонна может выполнять более 2000 входных анализов без регенерации или очистки.

Колонна хроматографии TSKgel Protein A - 5PW заполнена высокопарными полимерными шариками гидроксилированной метилакриловой кислоты, что позволяет использовать высокую скорость потока в хроматографическом анализе при сохранении эффективности хроматографии, ширины пика и разделения. Его рекомбинантная белковая группа А представляет собой модифицированный кодоном гексамер C - домена. Этот усиленный рекомбинантный белок А связывается с микроволнами матрицы TSKgel 5PW через многоточечные адгезионные связи, что обеспечивает отличную стабильность в растворе 0,1 моль / л NaOH.

Колонна хроматографии TSKgel Protein A - 5PW имеет широкий диапазон верхних образцов и может точно определить ценность моноклональных антител на различных этапах обработки клеточной питательной жидкостью. Низкий уровень протеина А делает его идеальным вариантом для мелкомасштабной очистки моноклональных антител для первоначальных признаков.

TSKgel Protein A - 5PW представляет собой аффинную хроматографическую колонну, которая импортирует рекомбинантную функциональную массу Protein A на поверхность наполнителя TSKgel G5000PW пористой гидрофильной полимерной матрицы и заполняет ее в трубку колонны PEEK.

Поскольку Protein A может специфически связываться с областью Fc IgG, Protein A может специфически абсорбировать IgG из образцов, таких как очищающая жидкость, содержащая IgG и примеси. Кроме того, калибровка производится с использованием известных концентраций IgG

Кривая, которая может количественно определить концентрацию IgG в неизвестном образце.

Метод связывания матрицы, функциональных групп и функциональных групп хроматографической колонны TSKgel Protein A - 5PW идентичен методу связывания масс, функциональных групп и функциональных групп с насыпным наполнителем TOYOPEARL AF - rProtein A HC - 650F. Таким образом, эта хроматографическая колонна обладает аналогичными свойствами разделения и отбора, как и TOYOPEARL AF - rProtein A HC - 650F.

Из - за большого размера частиц и высокой механической прочности матрицы эта хроматографическая колонна может использоваться в условиях высокой скорости потока, а также для анализа высокого потока IgG. Кроме того, поскольку эффект растворения наполнителя, вызванный изменением растворителя, относительно невелик, его можно добавлять в фазу потока

С органическими растворителями.

Кроме того, в хроматографической колонне используются функциональные группы с высокой химической стабильностью и щелочестойкостью, поэтому ее можно промыть с помощью водного раствора NaOH. При очистке хроматографической колонны с помощью водного раствора NaOH, введите 0,1 моль / л водного раствора NaOH 0,5 из входного клапана.

~ 2 мл.

2 - 2. Стандартные условия разделения

Большинство IgG адсорбируется Protein A в нейтральных условиях (pH 7.0 - 7.5) и смывается в кислых условиях (pH 2,5 - 3,5), поэтому при разделении антител с помощью TSKgel Protein A - 5PW обычно используется порядок двух различных растворов pH.

Градиентная стирка.

Абсорбция и стирка проточных фаз обычно используют фосфатные буферы, но подвижные фазы также могут использовать низкоpH - лимонатные буферы. После предварительного равновесия хроматографической колонны с помощью адсорбционного буфера (равновесие с использованием буфера, в 5 раз превышающего объем колонны), образец

После этого только IgG был адсорбирован на столбе. После этого замените его на промытую проточную фазу, стирающую IgG.

Высокая концентрация соли может быть добавлена в проточную фазу (например, 0,15 моль / л NaCl и т. Д.), но IgG с высокой гидрофобией подвержен неспецифической адсорбции на хроматографической колонне, что требует большего внимания. Кроме того, при анализе IgG с высокой гидрофобией, в плоскости

Добавление растворимых в воде органических растворителей, таких как этанол, или концентрированной кислоты AN (0,2 моля / л) в уравновешивающие и моющие средства может эффективно подавлять неспецифическую адсорбцию. Однако вышеизложенное может привести к колебаниям базисного уровня из - за смены фазы потока, поэтому перед выбором, пожалуйста, добавьте

Смена фазы потока и подтверждение.

Пример фазы потока

Пример 1

Текущая фаза A: 20 mmol / L фосфат натрия буфер, pH 7.4

Фаза текучести B: 20 mmol / L фосфат натрия буфер, pH 2.5

Пример 2

Мобильная фаза A: 20 mmol / L фосфат натрия буфер, pH 7.4 / этанол = 90 / 10 (v / v)

Фаза текучести B: 20 mmol / L фосфат натрия буфер, pH 2.5 / этанол = 90 / 10 (v / v)

Пример 3

Мобильная фаза A: 20 mmol / L фосфат натрия буфер, pH 7.4

Текущая фаза B: 50 ммоль / л лимонат натрия буфер, pH 2.5

Высокопроизводительная аффинная хроматографическая колонна TSKgel Protein A - 5PW имеет хорошую прочность и может быть очищена щелочным раствором для быстрой и высокоточной количественной оценки IgG в клеточной питательной жидкости, содержащей больше примесей. Кроме того, IgG имеет широкий количественный диапазон и может использоваться для анализа проб с низкой концентрацией до высокой концентрации на ранних стадиях культивирования.

TSKgel Protein A - 5PW Технические характеристики и информация о заказе

Технические параметры

проектпараметр

апертура100 нм

Размер зерна20 µm

Стабильность pH2.5 - 12

Предел выпуска1000 кДа

Распределение радикаловРекомбинантный белок А (гексамер C - домена)

Плотность распределения0,9 - 1,0 г / л гель

Информация о заказе

Номер продукта (P / N)описаниеразмер

0023483TSKgel Protein A - 5PW хроматографическая колонка4.6 мм внутренний диаметр x 3,5 см длина

TSKgel Protein A - 5PW хроматографическая колонка

Наньтунхай