Линейный полиэтиленамид транскрипционного класса (MW25000)

Линейный поливиниламид (MW25000Это продукт мгновенного транскрипционного реагента на основе поливиниламида с высоким транскрипционным эффектом. Полиэтиленамид представляет собой органический макромолекулярный полимер с высоким ионным зарядом Ян, который легко связывается с молекулами нуклеиновой кислоты с отрицательным зарядом, образуя комплекс с положительным зарядом. Этот комплекс связывается с анионами на поверхности клетки и проникает в клетку путем внутреннего проглатывания. Этот транскрипционный реагент имеет низкую клеточную токсичность, подходит для многих клеточных линий и широко используется в рекомбинантных белках,ААВПроизводство и т.д.

1. Настройка реактивов

Необходимые материалы:

Деионизированная или более биологическая вода,12 моль/лСоляная кислота (ГХл),10 моль/л* (NaOH) Одноразовые0,1 ~ 0,2μм ПЭСВакуумный стерильный фильтрHDPEИли бутылки для хранения полипропилена.

Конфигурация жидкости для хранения:

1. поставить1 гЛинейный полиэтиленамид транскрипционного класса25 тысяч.Раствориться900 млДеионизированная вода, перемешиваемая во время (может нагреваться до60 - 80°C) Боковые капли плюс12 MСоляная кислота, скорректированная доpH<2.0Смешивать3Более часа до растворения;

2. использовать10 M* КорректировкиpHдо6.9 - 7,1*

3. Перевод раствора в измерительный цилиндр (или стакан)Внутри, с водойУверенный объем1 L*

4. Одноразово.0.2 µmФильтр вакуумная фильтрация стерилизация, то есть получить1 мг/млЖидкость для хранения;

5. По мере необходимости может быть распределена жидкость для хранения.-20При температуре °С можно сохранить1год; Жидкость для хранения не может быть вновь заморожена после восстановления.

2. Транскрипционный процесс

Прививка клеток: чтобы повысить эффективность транскрипции, рекомендуется вводить клетки за день до транскрипции, чтобы транскрипция при плотности клетокв70 - 80%Для удобства*

готовитьсяДНК- Транскрипционные реагенты.Комплекс:

1. поставитьДНКТранскрипционные реагенты и разбавители возвращаются к комнатной температуре;

2. Разбавить нужное количество подходящей безбелковой питательной средойДНК*

3. В определенной пропорции(Каждый1 мкг ДНКПотребности1-5 мклРеактор транскрипции, рекомендуется самостоятельно нащупать соотношение)После разбавления капли транскрипционного реагента добавляются в комплектДНКпробирка раствора(Не изменяйте порядок добавления)С одной сторонылегкоВихрь, полное перемешиваниеСтационарная комнатная температура10 - 25минутаИнкубацияА.

Транскрипционные клетки:

1. При транскрипции без сыворотки, удалите клеточную питательную среду и замените ее без сыворотки;

2. Добавьте в клетки достаточное количествоДНК- Транскрипционные реагенты.КомплексСлегка смешатьТранскрипция6 - 8Через час замените свежеразогретую питательную среду.*

3. в37℃А5% СО₂Культурный ящикчжунКультивирование, транскрипция после24часМожно обнаружить экспрессию трансгенных генов (можно самостоятельно определить подходящее время тестирования).

Условия перевозки и хранения

Условия перевозки: перевозка при комнатной температуре

Условия хранения: порошок при комнатной температуре или4Сохранение при температуре °С, срок действия2В 1997 году.

Меры предосторожности

1. Для большинства клеток, каждый1 мкг ДНКиспользовать3 мклТранскрипционные реагенты могут получить более высокую эффективность транскрипции, вы также можете попробовать каждый1 мкг ДНКиспользовать1,5~4 мклТранскрипционные реагенты оптимизированы.

2. Для вашей безопасности и здоровья, пожалуйста, носите лабораторный костюм и одноразовые перчатки.

3. Данный продукт предназначен только для научных целей.