Технические услуги Fish

Технические услуги Fish обычно используются на ранней стадии для понимания амплификации, отсутствия, слияния или разрушения генов или хромосом, а также для дородовой диагностики, послеродового обнаружения генетических заболеваний, диагностики опухолей и предварительной оценки. Источники выборки обширны: ткани, отслоенные клетки, амниотическая вода, кровь, костный мозг могут быть обнаружены и не ограничиваются свежими образцами, образцы парафина в течение 2 - 3 лет могут быть обнаружены.

FISH также обнаруживает нуклеиновые кислоты в тканевых чипах (в настоящее время часто используется для обнаружения NCRNA: microRNA, lncRNA, circRNA), может знать экспрессию нуклеиновых кислот в десятках или сотнях образцов, может быть использована для анализа различий в экспрессии нуклеиновых кислот рядом с раком, корреляции между экспрессией нуклеиновых кислот и продолжительностью жизни, связи между экспрессией нуклеиновых кислот и развитием опухолей и т.д.

Экспериментальный процесс технического обслуживания Fish:

Технические услуги FishFlorescence In - Situ Hybridization (FISH) - это метод обнаружения первичных гибридных образцов с использованием нерадиоактивных флуоресцентных сигналов. Он сочетает в себе высокую чувствительность, безопасность флуоресцентных сигналов, интуитивность флуоресцентных сигналов и высокую точность скрещивания на месте, скрещивание на месте с ДНК подлежащего измерению образца с помощью флуоресцентного детектора ДНК, идентификацию и подсчет флуоресцентных сигналов под флуоресцентным микроскопом, что позволяет обнаруживать и диагностировать образцы клеток и тканей с хромосомными или генетическими аномалиями и обеспечивает точную основу для сортировки, прогнозирования и прогнозирования различных генетически связанных заболеваний. С конца 1980 - х годов, когда Пинкель и Хейлз внедрили технологию FISH в области хромосомного тестирования, технология FISH широко используется в клинической диагностике и научных исследованиях, демонстрируя очевидные преимущества по сравнению с некоторыми традиционными методами.

Флуоресцентная гибридизацияТехнические услуги FishПо сравнению с традиционной химией иммунной ткани (IHC), FISH обладает хорошей стабильностью и повторяемостью. В настоящее время химия иммунной ткани широко используется в клинической диагностике во многих областях, таких как опухоли. Иммуногимизация проверяется на белки, связанные с болезнью. Поскольку экспрессия белка и его собственная конфигурация сильно зависят от различных факторов (например, кислоты, щелочи и дегенераторы), стабильность условий обнаружения имеет решающее значение для результатов. Кроме того, суждение о результатах иммуногистологического теста зависит от субъективного суждения тестируемого о ярко выраженных результатах, и для некоторых слабоположительных результатов разные тестеры склонны к разногласиям. Все вышеперечисленные факторы могут повлиять на окончательный диагноз врача.

Флуоресцентная гибридизацияТехнические услуги FishОбъектом является ДНК в клетках, плотная двойная спиральная структура, которая позволяет ДНК оставаться хорошей в течение миллионов лет, ее структура стабильна и не подвержена воздействию условий окружающей среды, обеспечивая хорошую основу для стабильности технологии флуоресцентной гибридизации на месте. Кроме того, определение результатов флуоресцентной гибридизации на месте объективно измеряет результаты обнаружения с помощью определения цвета флуоресценции и подсчета сигналов. При помощи соответствующих операционных систем FISH (например, гибрида Hybrit компании Abbott - Vysis и системы предварительной обработки образцов VP2000) и систем визуализации хромосом можно автоматизировать все операции FISH, значительно снижая субъективные факторы операторов и тестировщиков и обеспечивая точность результатов.

Из - за высокой чувствительности, простоты и быстроты работы PCR в последние годы применяется больше методов генетической диагностики, но технология PCR диагностика имеет более высокий процент ложно - отрицательных и ложно - положительных, один и тот же образец может быть проанализирован только один раз, не может повторить результаты эксперимента. По мере того, как технология зондов продолжает развиваться, чувствительность FISH в настоящее время приближается или достигает уровня PCR и хорошо компенсирует ограничения технологии PCR. Фиш - тест на флуоресцентную гибридизацию in situ не только имеет очень низкий процент ложноположительных и ложноотрицательных (например, дородовой диагностический зонд Эббота - Выйсиса, 29 000 случаев использования подтвердили правильность до 99,9%), но также несколько операций FISH на одном и том же образце и использование флуоресцентных зондов разных цветов для обнаружения аномалий в нескольких хромосомах или генах за один раз, что значительно экономит время тестирования. Кроме того, принятоТехнические услуги FishДиагностические исследования могут проводиться в отношении аномального количества хромосом или конкретных генов, отсутствия, транслокации и перегруппировки определенных фрагментов.

Fluorescence in situ hybridization (FISH) - метод, используемый для отображения последовательностей ДНК в ядре или хромосоме на основе принципа гибридизации неактивных флуоресцентных материалов с помощью детекторов нуклеиновой кислоты. Эта технология обладает характеристиками быстрой, безопасной, высокой чувствительности и долгосрочного сохранения зондов и в настоящее время широко используется в таких областях, как клеточная генетика, онкобиология, генетическая локализация, генетическое картирование, расширение генов, дородовая диагностика и исследования эволюции хромосом млекопитающих.

Проще говоря, принцип комплементарности оснований заключается в том, что мы спариваем экзогенные нуклеиновые кислоты (обычно называемые молекулярными зондами) с ДНК или РНК, которые должны быть обнаружены в тканях и клетках, образуя гибридную молекулу нуклеиновой кислоты, а затем показываем местоположение этой гибридной молекулы определенными средствами.

РНКА＞ДНАРНА＞ДНАРНА

　　Технические услуги FishШироко используется в таких областях, как клеточная генетика, онкобиология, генетическая локализация, генетическое картирование, расширение генов, дородовая диагностика и исследования эволюции хромосом млекопитающих.

Флуоресцентная гибридизация на месте упрощает обнаружение структурных вариаций хромосом. Если гетерохромосомы растений являются результатом аномального поведения хромосом, то это может быть вызвано такими факторами, как количество и структура двойных гаметохромосом или более отдаленное родство хромосом. Использование первичной гибридизации позволяет легче обнаруживать недостающие, дополнительные или заменяемые хромосомы.

Пространственное разрешение и чувствительность FISH позволяют локализовать родительские и амплифицированные гены в клетках, устойчивых к вредителям. Амплифицированные гены в основном находятся на одной и той же хромосомной руке, но находятся на некотором расстоянии от первоначального родительского гена и часто независимо расположены на теломер хромосомы; Анализ FISH показывает, что разрушение клеток может быть вызвано структурной перегруппировкой хромосом, содержащей области амплификации. В то же время FISH может определять местоположение и количество копий экзогенных генов в генетически модифицированных растениях, и этот метод был успешным в томатах, табаке, ячмене, пшенице, ржи и других культурах. Технология FISH также позволяет обнаружить некоторые генетические дефекты, связанные с наследственными заболеваниями, такие как успешное обнаружение недостающих генов у пациентов с болезнью аниридия.

Широко используется технология генной локализации флуоресцентной гибридизации. Гены, связанные с мутантным раком легких PP2AC, локализуются в хромосомных областях, наблюдая, записывая и анализируя характеристики гибридных сигналов под флуоресцентным микроскопом. В результате были видны сигналы скрещивания в хромосоме 5q23 - 31 нормальных лимфоцитов человека и более сильные сигналы в хромосомах 5 и 7 клеток GLC - 82. Пояснительная точечная мутация вызывает изменение активности PP2Ac, что приводит к транслокации генов, что приводит к образованию опухоли легких. Технология FISH в сочетании с биохимическими, компьютерными и рекомбинантными методами ДНК обнаруживает Alu - сайты, указывая на то, что последовательность ДНК связана с зонтичным типом. Исследование распределения кодированных генов в геноме человека с помощью технологии FISH показало, что гены сосредоточены в основном в сегменте ДНК G + C (35% всего генома) на хромосоме. Технология FISH предоставляет важные средства для изучения структуры гранул. Применение технологии FISH позволяет непосредственно наблюдать хромосомные теломеры, что упрощает изучение структуры и функций хромосом в ядре.