Набор для обнаружения размножения клеток МТС

Набор для обнаружения размножения клеток МТС(MTS Cell Proliferation Assay Kit) - распространенный набор для обнаружения размножения клеток и токсичности. МТС - это новый тип тетраазола, который может быть восстановлен дегидрогеназой янтарной кислоты в митохондриях живых клеток в растворимый в воде продукт метиламин (Formazan). Метамфетамин имеет специфическое поглощение на 490 нм, поэтому он может отражать размножение клеток, измеряя поглощение на 490 нм. Чем быстрее размножаются клетки, тем выше их поглощение.
По сравнению с обычными наборами MTT, этот набор не требует удаления первоначальной среды или дополнительного использования растворителя для растворения метиламина, более удобный в использовании, избегая экспериментальных ошибок, вызванных удалением части метиламина при удалении среды. Этот набор реагентов используется очень гибко и может продолжать инкубацию после тестирования, чтобы получить лучшие результаты цвета. Кроме того, этот набор реагентов также имеет преимущества ширины линейного диапазона, высокой чувствительности, безопасности использования и так далее.
Компоненты продукции:

Экспериментальные операции:
Производство рабочей жидкости МТС:
Смешивание MTS Solution и PMS Solution в соотношении 20: 1 является рабочей жидкостью МТС. Подготовленная рабочая жидкость МТС, если она должна храниться, должна быть помещена в светонепроницаемое хранение при температуре 20°C, и в это время рекомендуется соответствующее количество, чтобы избежать повторного замораживания и оттаивания.
Примечание: как MTS Solution, так и PMS Solution легко разлагаются, поэтому при их сборке и использовании необходимо избегать света (его можно завернуть в оловянную бумагу). Если требуется частое использование, вы хотите сохранить этот комплект при 4°C, в это время каждый раз перед тестированием должна быть приготовлена рабочая жидкость МТС. Приготовленный неиспользованный рабочий раствор МТС должен быть помещен в светонепроницаемый режим хранения при 20°C.
2.Клеточная культура:
Клетки вводятся в подходящие контейнеры, такие как диафрагма. Для 96 - пористой пластины рекомендуется добавлять питательную среду 100ul на отверстие, а также проводить вакцинацию 5 - 100×10 на отверстие.3Одна клетка. Интересующие клетки экспериментальной группы могут быть обработаны в течение некоторого времени в соответствии с экспериментальным дизайном, когда необходимо создать дополнительные пустые группы (только питательные среды) и контрольные группы (содержащие питательные среды, клетки и фармацевтические растворители).
Примечание: Конкретное количество клеток на отверстие может быть скорректировано в зависимости от конкретного типа клеток.
Инкубация МТС:
В каждое отверстие добавляется 20 мкл рабочей жидкости МТС, которая затем помещается в инкубатор для выращивания клеток в течение 1 - 4 ч.
Примечание: Время инкубации МТС может быть скорректировано в зависимости от конкретного эксперимента.
4 Тестирование:
Абсорбция (А) измеряется с помощью ферментного маркера на 490 нм. При отсутствии фильтра 490 нм можно выбрать фильтр 450 - 540 нм.
5 Анализ данных:
Формула выживания клеток выглядит следующим образом.
Выживаемость клеток (%) = [A]Экспериментальная группа- АПустая группа) / (AКонтрольная группа- АПустая группа] х 100

Когда клетки культивируются в течение длительного времени, краевые отверстия 96 - пористой пластины подвержены проблемам испарения жидкости. Рекомендуется отказаться от 96 - пористой пластины вокруг круга и добавить стерильную воду, питательную среду или PBS; В то же время 96 пластин могут быть помещены в инкубатор вблизи источника воды.
MTS Solution и PMS Solution затвердевают при низких температурах, предварительно возвращаясь к комнатной температуре или водяной ванне с температурой 37°C примерно на 10 мин до полного таяния.
MTS Solution и PMS Solution чувствительны к свету, и при сохранении при 4°C цвет раствора может слегка измениться, что может привести к повышению фоновой абсорбции, но не повлияет на окончательные результаты эксперимента.
При отсутствии своевременного обнаружения 10% реакции SDS может быть прекращена путем добавления 25ul в каждое отверстие после завершения инкубации на этапе 3. Устройства, обработанные SDS, могут быть размещены
Хранить в инкубаторе не более 18 часов.
Для вашей безопасности и здоровья, пожалуйста, наденьте лабораторный костюм и используйте одноразовые перчатки.

Храните комплект при -20 ° С подальше от света и влаги, стабильный в течение 1 года. Для частого использования комплект может храниться при температуре 4 ° C, подальше от света и влаги, стабильный в течение 6 недель.