Американский ген GeneCopoeia (репликативный ген) предлагает клонирование целевой экспрессии на основе * геномных miRNA - эффектов, которые охватывают публичные базы данных. Микронирование экспрессии мишеней miRNA включает в себя последовательность 3 '- UTR (т. е. место действия miRNA), непосредственно вниз по течению от инициирующего суб - гена SV40 (флуоресцентная фермента светлячка). Второй зарегистрированный ген renilla luciferase может быть использован для мониторинга транскрипции, эффективности экспрессии и может использоваться в качестве эндогена.
Микрономическая мишень генома человека выражает особенности клонирования
Анализ активности флуоресцентной ферменты светлячка позволяет получить результаты регуляции микроРНК на потенциальные гены - мишени. Выражение клонированной транскрипции приводит к образованию химерной мРНК флуоресцентной фермента светлячка ORF и 3 'UTR, если есть специфическая miRNA, которая может быть дополнена последовательностью 3' - UTR, активность белка, кодируемого флуоресцентной ферментой ORF в химере, также регулируется соответствующим образом, поэтому эффект мРНК, соответствующей целевому регулированию, может быть количественно измерен путем определения интенсивности света флуоресцентной ферменты.
Прекурсоры miRNA и применение клонирования для экспрессии мишеней
- Регулирование экспрессии генов: введение одной или целого набора микроРНК в культивируемые клетки путем транскрипции или заражения вирусными частицами для регулирования экспрессии генов одной или несколькими микроРНК. Исследование регулируемых эффектов и функций микроРНК в конкретных условиях или формализации
- Идентификация и идентификация генов - мишеней miRNA: использование мишеней miRNA для проверки экспрессивного клонирования, скрининга и подтверждения генов - мишеней miRNA в больших масштабах. МиРНК может действовать на все гены - мишени, а также на одну мРНК 3 '- UTR всех миРНК