Тестирование на множественную иммуногистологию

Тестирование на множественную иммуногистологиюЭкспериментальные шаги:

1. Упакованные образцы нарезаны парафиновой машиной 3um

2. Выпекание при температуре 60°C в течение 1 часа

Дитолуол обезпарафинирован 10 мин.

ДитолуII депарафинирование 10 мин.

5. Градиентный спирт для восстановления воды: 100% алкоголь 5 минут, 100% алкоголь 5 минут, 95% алкоголь 5 минут, 80% алкоголь 5 минут, промывание проточной водой 5 минут

Выполнение антигенного восстановления: поместить срез в восстановительный раствор цитрата 0,1 моль / л и ph = 6.0, ванну с кипящей водой в течение 20 минут и естественное охлаждение после остановки нагрева в течение 20 - 30 минут

7. Используйте PBS 3 минуты 3 раза, чтобы нарисовать круг штрихов, капли с перекисью кислорода, инкубация 20 мин

Используйте PBS 3 минуты 3 раза, капли с закрытой сывороткой в течение 1 часа

9. Инкубация при температуре 4°C в противообрастающей мокрой коробке с высыханием, каплями и соответствующей концентрацией на ночь

Смыть PBS 3 минуты × 5 раз

11. Высыхание, капля плюс два анти - комнатной температуры инкубационный инкубатор инкубатор инкубатор в течение 1 часа (обратите внимание на два антигена, 30 мин летом, 1h зимой)

Вымойте два сопротивления с помощью PBS 3 минуты × 5 раз

13.Выбросить сухой, капли плюс DAB цвета, водяной удар

Сулумин - хроматин 5 мин (новая конфигурация сульфина в зависимости от ситуации)

15. Промывание избыточного сульфина проточной водой, дифференциация в растворе в течение 1 секунды

Промывание водой 5 мин.

17. Градиент спирта для восстановления воды: 80% алкоголя 5 минут, 95% алкоголя 5 минут, 100% алкоголя 5 минут, 100% алкоголя 5 минут, ксилол II прозрачный 5 мин, ксилол I прозрачный 5 мин (если для полной прозрачности, время может быть соответствующим образом увеличено)

18. Закрытие нейтральной смолой

19. Зеркальное обследование