- Электронная почта
- Телефон
- Адрес
Шанхайская биотехнологическая компания Ланцзянь
Мультимоиммуногенное крашениеЭкспериментальные шаги
Подготовка образцов: включает обработку парафиновых срезов, замороженных срезов или клеточных ползунов, таких как фиксация, восстановление антигенов, блокирование эндогенных пероксидазы и т.д.
Один противоинкубационный: капля плюс разбавленный антитело раствор для разбавления хорошего сопротивления, инкубация в светонепроницаемой коробке в течение определенного времени.
ii) против инкубации: после промывки добавьте два сопротивления маркерам HRP с одним анти - соответствующим родом, избегая инкубации при комнатной температуре.
TSA флуоресцентное окрашивание красителей: капля с флуоресцентным красителем с казеином, реакция комнатной температуры в течение некоторого времени после стирки.
Смывание антител: стирание антител предыдущего раунда с помощью терморегуляции или раствора для снятия антител для следующего раунда маркировки.
Повторная маркировка: Повторите вышеуказанные шаги, используя различные анти - и флуоресцентные красители для достижения множественной маркировки.
Повторное крашение ядра и пломбы: повторное окрашивание ядра с помощью ядерного красителя, такого как DAPI, капля плюс антифлуоресцентная закалка пломбы.
Зеркальная съемка: наблюдение и сбор изображений с помощью таких устройств, как флуоресцентный микроскоп.
Мультимоиммуногенное крашениеМеры предосторожности
Выбор и оптимизация антител: выберите высокоспецифичные, проверенные антитела и оптимизируйте концентрацию антител и время инкубации и другие условия.
Проблема маскировки поверхности: обратите внимание на последовательность окрашивания антител, чтобы избежать маскировки поверхности, которую можно решить путем корректировки последовательности антител или с помощью других методов.
Параметры экспериментального контроля: установление положительного и отрицательного контроля для обеспечения точности и достоверности результатов эксперимента.
Управление кратностью усиления сигнала: в соответствии с конкретными экспериментальными потребностями и интенсивностью флуоресцентного сигнала разумно выбрать, следует ли добавлять усилитель TSA и другие средства для управления кратностью усиления сигнала.