- Электронная почта
- Телефон
-
Адрес
www.shklsw.com
Категории продукта
上海康朗生物科技有限公司
TE - 6 Раковые клетки пищевода человека
ДоговариваемыйОбновление на05/06
- Модель
- Природа производителя
- Производители
- Категория продукта
- Место происхождения
Обзор
TE - 6 Раковые клетки пищевода человека - это стенковая клетка, клеточная форма проявляется как эпителиальный образец, ткань происходит из: пищевода.
Подробности о продукте
Основные свойства клеток. | |
Название клетки |
TE - 6 Раковые клетки пищевода человека |
Клетки называются |
ТЭ-6 |
Артикул товара |
КЛ-C0007H |
Родные источники |
человек |
Возраст и пол |
Мужчины 71 год |
Источник организации |
Пищевод |
Характеристика роста |
Стенный рост |
Клеточная форма |
эпителиальный образец |
Справочная информация |
- |
Класс биобезопасности |
- |
Клеточные спецификации |
1 × 10 ^ 6cells / T25 Культурные бутылки или упаковка 1 мл охлаждающей трубки |
Обнаружение микоплазмов |
нет |
Среда |
РПМИ1640+10 �S |
Условия культивирования |
Газовая фаза: 95% воздух + 5% углекислыйгаз; Температура: 37°C |
Условия замораживания |
Хранение жидкого азота без сывороточной заморозки |
Время удвоения |
~ 24 - 30 часов |
Клеточный скрининг:
Клетка представляет собой клетку, которая стабильно трансформировала LUC, и ее интенсивность флуоресценции LUC постепенно уменьшается по мере увеличения количества поколений клеток. Если эксперимент требует поддержания интенсивности флуоресценции, можно добавить пуриномицин для повторного скрининга.
Клетки проходят скрининг 20 мкг / мл пуриномицина, обычно культивируются для поддержания 10 мкг / мл пуриномицина
II. Обработка после приема клеток
1) После получения клетки, 75% стенки бутылки для дезинфекции алкоголя помещает бутылку T25 при комнатной температуре около 1 ч. Если вы обнаружите, что бутылка для культивирования повреждена, есть разлив жидкости и клетки загрязнены, пожалуйста, свяжитесь с нами вовремя после фотографирования.
2) Подтвердите состояние клетки под микроскопом 4 или 5X, сохранив 2 - 3 фотографии только что полученных клеток (10 ×, 20 ×) и 2 - 3 фотографии внешнего вида культивируемой бутылки в качестве основы для состояния клетки при получении после продажи.
3) Клетки, прикрепленные к стенке: клетки помещаются при комнатной температуре в течение 1ч, под микроскопом наблюдаются рост клеток и прикрепление к стенке, а некоторые прикрепленные к стенке клетки образуются в результате вибрации и выпадения во время экспресс - доставки. Если плотность роста клеток, наблюдаемых под зеркалом, составляет менее 60%, можно удалить питательную среду для орошения в бутылке для культивирования (если есть клетки, которые не прикреплены к стенке, нуждаются в центробежной рекуперации, повторной суспензии в оригинальную бутылку для культивирования), добавить новую игровую полную питательную среду 6 - 8 мл и поместить ее в клетку для культивирования, чтобы продолжить культивирование. Если плотность роста клеток составляет более 70% - 80%, клетки могут быть трансформированы. В процессе передачи клетки, которые выпадают из - за вибрации транспорта, нуждаются в центробежной переработке.
4) Метод удаления клеток во время транспортировки: Сбор сброшенных клеток после центрифугирования и удаления, очистка с помощью PBS, центрифугирование и удаление, добавление 1 мл ээнзима в центрифужную трубку для рассеивания пищеварения около 20 секунд, плюс полная питательная среда для прекращения пищеварения после центробежной прокладки, оставшиеся клеточные клетки, прикрепленные к стенке, работают в соответствии с нормальным методом передачи клеток, прикрепленных к стенке.
5) Примечание: Транспортные питательные среды (поливные питательные среды) больше не могут использоваться для культивирования клеток, пожалуйста, замените их игровыми цельными питательными средами, недавно подготовленными в соответствии с условиями культивирования клеток инструкции. После получения клетки рекомендуется первая передача T25 Культурная бутылка 1: 2.
III.TE - 6 Раковые клетки пищевода человекаВоспитание операций
1) Реанимационные клетки: следующие клеточные культуры замораживания обработки только для справки, конкретные шаги в соответствии с инструкцией по продукту в качестве основного для замораживания трубки, содержащей 1 мл клеточной суспензии, быстро размораживаются в водяной ванне 37°C, плюс 4 мл питательной среды смешиваются равномерно. Центрифугирование в течение 3 мин при 1000 рpm, сбрасывание очищающей жидкости, добавление 1 - 2 мл питательной среды после дутья равномерно. Затем все клеточные суспензии добавляются в бутылку с умеренным количеством питательной среды для культивирования на ночь (или добавляют клеточную суспензию в чашку 6 см, добавляя около 4 мл, чтобы играть в полную питательную среду, культивируя ночь). На третий день менять жидкость и проверять плотность клеток.
2) Клеточная транскрипция: если плотность клеток достигает 80% - 90%, можно проводить культуру транскрипции.
a) Выбросить культуру верхней очистки и промыть клетки 1 - 2 раза с помощью PBS, который не содержит ионов кальция и магния.
b) Добавить 1 мл пищеварительного раствора (0,25% Trypsin - 0.02 - TA) в питательную бутылку, чтобы пищеварительная жидкость проникла во все клетки, поместить питательную бутылку в инкубатор 37°C для переваривания 1 - 3 мин (в зависимости от пищеварения клетки), затем наблюдать пищеварение клетки под микроскопом, если большая часть клетки округлена и выпадает, быстро вернуть консоль, несколько ударов по питательной бутылке после добавления 2 - 3 мл играть в полную питательную среду, чтобы прекратить пищеварение.
c) После мягкого выравнивания в стерильную центрифужную трубку, 1000 rpm центрифуга 5 мин, отбросить очищающую жидкость, добавить 1 - 2 мл питательной жидкости после дутья равномерно.
d) Разделите клеточную суспензию в новую чашку или бутылку, содержащую 8 мл питательной среды, в пропорции 1: 2 и поместите в инкубатор для культивирования.
Сосредоточьтесь на стенных клетках:
Обязательно нужно помыть PBS.
• Клетки наблюдают несколько раз больше, чтобы овладеть временем, не прекращая переваривание и не дуя, пока клетка в основном не выпадает, так что клетки легче дифференцировать и умирать.
Не пытайтесь постоянно бить клетки.
3) Замораживание клеток: Когда клетки растут в хорошем состоянии, может проводиться замораживание клеток. В качестве примера можно привести следующие бутылки T25;
a) Сбор клеточной и клеточной питательной жидкости, в стерильную центрифужную трубку, в условиях 1000 rpm центрифуга 4 мин., отбросить очищающую жидкость, очистить ее PBS снова, отказаться от PBS, провести подсчет клеток.
b) В соответствии с количеством клеток добавить бесссывороточный клеточный замораживающий раствор, так что плотность клеток 1×10 ^ 6~ 1×10 ^ 7 / мл, мягко перемешивается, каждая замороженная трубка замораживает 1 мл клеточной суспензии, обратите внимание, что замороженная трубка хорошо идентифицирована.
c) Поместите трубку замораживания в холодильник с температурой 80°C и переведите ее на хранение жидким азотом через 24 часа. Запишите расположение замороженной трубки, чтобы получить ее в следующий раз.
IV. Повышение внимания
1) Возникновение проблем с клетками, повторное повторение ситуации
a) различные проблемы, возникающие на пути транспортировки клеток, потеря клеток, повреждение корпуса бутылки, серьезная утечка питательной жидкости и т. Д. Повторные вспышки;
b) проблема клеточного загрязнения, пожалуйста, в течение 3 дней после получения продукта, чтобы представить нам реальные экспериментальные результаты, проверить и повторно отправить;
c) через 2 часа после статического состояния клеток, отправленных при комнатной температуре, через 2 дня после восстановления клеток, отправленных с замораживанием сухого льда, подавляющее большинство клеток не выжило (необходимо предоставить реальные и четкие фотографии клеточного состояния), повторная отправка;
d) сухой лед замораживает отправленные клетки через 2 дня после восстановления или при комнатной температуре отправленные клетки остаются в состоянии покоя в течение 2 часов и не вскрыты, загрязнение, повторные вспышки;
e) проблема клеточной активности, пожалуйста, представьте нам реальные экспериментальные результаты в течение 7 дней после получения продукта, используйте метод синего крашения, чтобы определить жизнеспособность клеток, и ежедневные фотографии клеток, которые будут проверены и повторно отправлены;
f) В день получения клетки, а также на 2 - 3 - й день, пожалуйста, сфотографируйте, 3 - й день без уведомления, считается, что продукт соответствует. Возникновение проблем в течение 4 - 7 дней требует предоставления фотографий первых 3 дней получения клетки и фотографий проблем, возникающих в клетке, а также подробных шагов, связанных с операциями, связанными с клеткой, и общения с техническим персоналом, который определяет нашу ответственность за повторную отправку.
2) Случаи, когда возникают проблемы с клетками, которые не воспроизводятся
a) Клиентская операция вызывает клеточное загрязнение, не повторяется;
b) Клиент совершает серьезные ошибки в работе, приводящие к плохому состоянию клетки, без повторной отправки;
c) плохое состояние клеток, вызванное не рекомендованной нами системой клеточной культуры, не повторяется;
d) Клеточное состояние плохое, не дает реалистичных и четких фотографий клеточного состояния за 3 дня до культивирования, не пересылает;
e) клеточная культура при другой обработке приводит к возникновению проблем в клетках, не повторяется;
f) получает клетки и обнаруживает проблемы в общении с обслуживающим персоналом в течение периода, превышающего 7 дней, без повторной отправки;
g) В зависимости от конкретных обстоятельств.
V. ПРИМЕЧАНИЯ
Все клетки животных считаются потенциально биологически опасными и должны работать в рамках вторичной станции биобезопасности, и обратите внимание на защиту, и все отходы и сосуды, подвергшиеся воздействию этой клетки, должны быть стерилизованы, прежде чем они могут быть выброшены.
Рекомендуется всегда использовать защитные перчатки, одежду и защитные маски при восстановлении замороженных клеток. Примечание: Замораживающая трубка, погруженная в жидкий азот, просачивается и медленно заполняется жидким азотом. При размораживании жидкий азот превращается в газовую фазу, что может привести к взрыву контейнера или сдуванию его крышки опасной силой, что приведет к образованию летающих обломков, наносящих ущерб людям.
3.Клетка предназначена только для научных исследований! Инструкция только для справки на основе фактического описания прибытия!
