Все в одном RT SuperMix для qPCR 试剂

Условия хранения и транспортировки

-20℃

Состав продукции

Все в одном RT SuperMix для qPCR 试剂

Описание продукта

All - in - One RT SuperMix for qPCR (с dsDNase) - это высокоэффективный, удобный и менее загрязняющий высококачественный комплект для синтеза CDNA первой цепи, содержащий все компоненты, необходимые для синтеза CDNA первой цепи, такие как M - MLV GIIReverse Transcriptase и его реакции, такие как Buffer, ингибиторы РНК - ферментов, dNTP, Oligo (dT) 20VN и случайные экстракты, для начала реакции достаточно добавить шаблон РНК и воду. All - in - One RT SuperMix for qPCR (withdsDNase) - это обновленный комплект для синтеза CDNA первой цепи, который может быть получен до 12 кб cDNA в течение 15 минут, и продукт может быть использован в таких экспериментах, как qPCR и обычный PCR. РНК, извлеченные из тканей или клеток, часто остаются загрязненными геномной ДНК, и если обработка не удаляется до обратной транскрипции, геномная ДНК и cDNA расширяются одновременно при реакции qPCR вниз по течению, особенно если экстракт спроектирован на одном и том же внешнем объекте, что влияет на количественную точность. DSDNase, используемый в этом наборе, способен специфически переваривать ДНК с двойной цепью или DNARNA, смешанной с двойной цепью, и обладает термочувствительностью для быстрой и необратимой потери активности при температуре реакции обратной транскрипции. По сравнению с традиционными методами удаления загрязнения ДНК генома DNase I, dsDNase не нуждается в дополнительном добавлении EDTA для деактивации, что не только экономит время эксперимента, но и снижает подавление реакций обратной транскрипции. В зависимости от степени загрязнения геномной ДНК может быть выбран метод дегеномного загрязнения ДНК отдельно от обратной транскрипции или один шаг за шагом дегеномного загрязнения ДНК и обратной транскрипции.

способ применения

Образец РНК с низким содержанием ДНК в геноме (рекомендуемый вариант)

Все в одном RT SuperMix для qPCR 试剂

На льду создаются следующие системы реакции:

Рекомендуется использовать в качестве шаблона высококачественную РНК, извлеченную из комплекта реагентов.

(2) Мягкое всасывание, смешивание, мгновенное удаление;

Температура при температуре 37°C 2 мин для удаления загрязнения ДНК генома;

При температуре 55°C 15 мин;

(5) После окончания реакции температура 85°C составляет 2 мин. для прекращения реакции;

• быстрое размещение полученной cDNA на льду для последующих экспериментов; Или немедленно сохранить при 20°C.

Образцы РНК с высоким содержанием ДНК в геноме

1. Удаление загрязнения геномной ДНК

На льду создаются следующие системы реакции:

a. В качестве шаблона рекомендуется использовать РНК, извлеченную из комплекта реагентов.

(2) Мягкое всасывание, смешивание, мгновенное удаление;

Температура при температуре 37°C 2 мин для удаления загрязнения ДНК генома;

ПРИМЕЧАНИЕ: Если ДНК генома в РНК сильно загрязнена, можно соответствующим образом продлить время температурного размножения 37°C до 5 мин.

При температуре 65°C 2 мин. деактивируется dsDNase и помещается на лед.

Первая цепь синтеза cDNA

На льду создаются следующие системы реакции:

(2) Мягкое всасывание, смешивание, мгновенное удаление;

При температуре 50 °C 15 мин;

Примечание: Если целевая РНК не содержит структуры Poly (A), она может предварительно размножаться при температуре 25°C 10 мин.

(4) После окончания реакции температура при температуре 85°C составляет 2 мин. для прекращения реакции;

Полученный раствор cDNA помещается на лед для последующих экспериментов.

Примечание: раствор cDNA помещается в хранилище - 20°C, рекомендуется не более 1 недели; Помещение при температуре - 80°С позволяет хранить в течение длительного времени.

Меры предосторожности

Предварительная смесь уже содержит Oligo (dT) 20VN и случайные экстракты и подходит не только для мРНК эукариотических организмов, содержащих структуру Poly (A), но и для протонуклеотидных РНК, эукариотических RRNA и tRNA, не содержащих структуру Poly (A), но не для небольших РНК - шаблонов, таких как miRNA.

Американская компания Azaood, основанная в 2004 году, занимается разработкой и производством высококачественных очищающих ферментов, белков, наборов для нуклеиновой кислоты и клеточного разделения, а также сывороток коровьего скота для исследований в области биологических наук, диагностики и биотехнологических применений. Компания Azood является ведущим производителем, сертифицированным по стандарту ISO9001 и отвечающим требованиям, предъявляемым к приложениям и требованиям от исследований до крупномасштабной биообработки и OEM.