T0P10感受态细胞*

T0P10 Чувствительные клетки *
Оригинальное название: * 0 Chemically Competent Cell
Товарные номера: G6015 - 20 (20 штук 100ul), G6015 - 100 (100 штук 100ul)
Технические характеристики / описание: G6015–20 (20 штук 100ul), G6015–100 (100 штук 100ul)

генТип

F- мкрАА(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80 лакЗАМ15АlacX74 recAl араА139А(ара-леу) 7697 galU galK rpsL (StrR) endA1 nupG

Краткое описаниеА.

Штамм T0P10, полученный из штамма MC1061, является одной из сенсорных клеток, используемых в настоящее время в лабораториях, с генотипом, очень похожим на DH10B (DH10B - gale15, а T0P10 - galu). CLBio * 0 растет быстрее (быстрее, чем DH5a, но медленнее, чем Mach1 - T1), 10 - часовой видимый клон, а мутации reca1 и enda1 способствуют стабильному и высокочистому извлечению плазмидной ДНК, вставленной в ДНК. Может использоваться для построения клонирования, сине - белого скрининга и других экспериментов, с цепной устойчивостью * *. Чувствительные клетки серии CLBio T0P10 были изготовлены с помощью специального процесса и были проверены на эффективность преобразования с помощью плазмиды pUC19 > 108cfu / мкг.

Описание операции:

CLBio * 0 Чувствующие клетки помещаются в лед, чтобы расплавиться (или отпустить сердце или комнатную температуру на мгновение, когда бактерия быстро вставляется в лед, когда она смешивается со льдом), добавить целевую ДНК (плазмиды или соединительные продукты) и аккуратно перемешать ее рукой по дну трубки EP, оставаясь на льду в течение 25 минут.

2.42°C водяная ванна нагревается в течение 45 секунд, быстро возвращается на лед и остается в течение 2 минут, качание снижает эффективность преобразования.

Добавление 700 мк1 стерильной среды 2YT или LB без антибиотиков в центрифужную трубку, после смешивания при 37°C 200 rpm восстановление в течение 60 минут.

4.5000rpm центробежный сбор бактерий в минуту, оставляя около 100 мк1, мягко вдувает тяжелые суспензионные блоки и наносит на питательную среду 2YT или LB, содержащую соответствующие антибиотики.

5. Поместите планшет в инкубатор 37°C для выращивания на ночь. Если операция скрининга сине - белого пятна выполнена, поместите планшет на 37 °C для культивирования не менее 13.

Меры предосторожностиА.

CLBio чувственные клетки тают на льду. Располагая лед примерно на 5 минут, он может расплавиться и добавить плазмиды в течение 8 минут после таяния, иначе это повлияет на эффективность преобразования.

2. При смешивании плазмиды или соединительных продуктов следует применять мягкий режим.

Преобразование высококонцентрированных плазмид или высокоэффективных соединений может привести к соответствующему сокращению количества бактерий, которые в конечном итоге используются для нанесения покрытий.

T0P10 Чувствительные клетки *