Бутилилжелчный * ингибитор эстеразы

Описание комплекта для обнаружения активности ингибиторов бутилхолинэстеразы *

видимая спектрофотометрия

Номер груза:БЦ5980

Спецификации:50T/48S

Состав продукта: Перед использованием тщательно проверьте, соответствует ли объем реагента объему внутри бутылки, пожалуйста, свяжитесь с персоналом Solebal вовремя.

Составление раствора:

1. Реактор I: перед использованием взять 1 реагент I, добавить1,8 млДистиллированная вода, полностью растворенная, нескончаемый реагент-20℃Можно сохранить после разделки4Неделя, избегайте повторного замораживания и оттаивания (реактив является замороженным сухим реагентом, может быть большое или даже небольшое количество между различными бутылками для наблюдения за реактивом невооруженным глазом, это явление не влияет на использование, фактическое качество одинаково).

2. Реактор IV: Добавьте 17 мл реагента II перед использованием, полностью растворенный, нескончаемый реагент-20℃Можно хранить раздельно4Неделя, избегайте повторного замораживания и таяния.

3. Реактор пять: открытый раствор 10 ммоль / л Леванса. Перед использованием возьмите открытый раствор 15 мкл 10 ммоль / л, добавьте 985.мклДистиллированная вода, приготовленная0.15Открытый раствор MMOL / L Леванса, в настоящее время в существующем комплекте (этот реактив используется для экспериментов с положительными трубками, выбран).

Описание продукции:

Бутырилхолинестераза (Butyrylcholinesterase)BchEА,EC3.1.1.8), также известный как плазменный холинэстераза, псевдохолинэстераза, представляет собой шелковый * кислотный гидролиз, синтезируемый печенью и входящий в кровь, который присутствует почти во всех тканях животных. Эфираза с ацетилжелчным пузырем (Ахе) По сравнению,BchEСпособны эффективно гидролизовать более крупные холецистичные * эфиры, такие как бутилжелчный * и бензоилжелчный *, а также очищать от токсического воздействия нервно - паралитических веществ, таких как фосфорорганические пестициды и карбаматные пестициды. Исследования показали,BchEЭто может быть важной мишенью для лечения болезни Альцгеймера,BchEИнгибиторы используются для улучшения таких симптомов, как потеря памяти и когнитивная дисфункция у пациентов с болезнью Альцгеймера.

BchE катализирует бутилжелчный пузырь * гидролизуя желчный пузырь *, желчный пузырь * образуется под действием дисульфиднобензойной кислоты (DTNB)5 - -Тиогликол-Нитробензойная кислота (ТНБ),BchEИнгибиторы проходят через ингибированиеBchEАктивная, уменьшающая гидролиз бутилжелчного пузыря *.ТНБв412 нмЕсть пик абсорбции, который можно измерить412 нмИзменение всасываемости, расчет активности ингибитора BchE.

Примечание: Перед экспериментом рекомендуется выбрать 2 - 3 образца с ожидаемой большой разницей для предварительного эксперимента.

Требуется оборудование и принадлежности:

Видимый спектрофотометр, весы, сушилка, измельчитель / ступа/Амортизаторы,30 - 50Зеркальное сито, ультразвуковой промыватель, центрифуга, водяная ванна/Термотермические инкубаторы,1 млСтеклянная чашка Петри, регулируемый переносчик жидкости, лед и дистиллированная вода.

Шаги действия: Конкретные шаги действия см. в документе "Информация о продукте"

Внимание:

Для обеспечения точности и стабильности результатов эксперимента строго контролируйте время реакции и время работы.

2.Образцовая абсорбция A '_{определение}Более 1,5 илиΔА_{определение}БлизостьΔА_{пустота}При этом рекомендуется увеличить долю тканевых образцов на этапе обработки образца или собрать образцы порошка в раствор с более высокой концентрацией. АΔА_{определение}При концентрации менее 0,01 образец может быть разбавлен экстрактом, а затем измерен.

Для сравнения степени ингибирования BchE различными реагентами, экстрактами, препаратами или тканями необходимо сравнить реагенты, экстракты, лекарственные средства или тканевые растворы, полученные в той же концентрации.

Примеры экспериментов:

1. Взять 0.1005g образца кожуры грейпфрута (сушить), добавить1 млЭкстракт для ультразвуковой экстракции, после центрифугирования для очистки, в соответствии с этапом измерения, с1 млСтекло и цветная посуда рассчитаны:ΔА_{пустота}= (А»_{Пустой 1}- А_{Пустой 1}) - (А»_{Пустой 2}- А_{Пустой 2}) =1.372 - 0.205)-（0.166 - 0.112)= 1.113А,ΔА_{определение}= (А»_{определение}- А_{определение}) - (А»_{Пустой 2}- А_{Пустой 2}) =1.117 - 0,485)-（0.166 - 0.112)= 0.578Расчет коэффициента подавления дает:

Коэффициент ингибирования BchE (В процентах)*（1.113 - 0.578)1.113×100% = 48.068%А.

2. Взять 0.1014 г образцов коры хурмы (сушить), добавить1 млЭкстракт для ультразвуковой экстракции, после центрифугирования для очистки, разбавления16После удвоения в соответствии с этапом измерения, используя1 млСтекло и цветная посуда рассчитаны:ΔА_{пустота}= (А»_{Пустой 1}- А_{Пустой 1}) - (А»_{Пустой 2}- А_{Пустой 2}) =1.372 - 0.205)-（0.166 - 0.112)= 1.113А,ΔА_{определение}= (А»_{определение}- А_{определение}) - (А»_{Пустой 2}- А_{Пустой 2}) =0.706 - 0.149)-（0.166 - 0.112)= 0.503Расчет коэффициента подавления дает:

Коэффициент ингибирования BchE (В процентах)*（1.113 - 0,503)1.113×100% = 54807%А.

3. Взять открытый раствор 50 мкл L 0.15 ммоль / л Леванса и работать в соответствии с измеренными шагами, используя1 млСтекло и цветная посуда рассчитаны:ΔА_{пустота}= (А»_{Пустой 1}- А_{Пустой 1}) - (А»_{Пустой 2}- А_{Пустой 2}) =1.372 - 0.205)-（0.166 - 0.112)= 1.113А,ΔА_{определение}= (А»_{определение}- А_{определение}) - (А»_{Пустой 2}- А_{Пустой 2}) =0.838 - 0.171)-（0.166 - 0.112)= 0.613Расчет коэффициента подавления дает:

Коэффициент ингибирования BchE (В процентах)*（1.113 - 0.613)1.113×100% = 44924%А.

Ссылки:

[1] Ellman GL, Courtney KD, Andres V Jr. et al. Новое и быстрое колориметрическое определение активности ацетилхолинестеразы [J]. Биохимическая фармакология, 1961, 7(2): 88-95.

[2] Нур Ататрех, Сара Аль Равашда, Шейха С Аль Неяди. Открытие новых ингибиторов бутирилхолинестеразы с помощью виртуального скрининга на основе структуры [J]. Журнал ингибирования ферментов и медицинской химии, 2019, 34(1): 1373-1379.

Li Q, Chen Y, Xing S. et al. Высоко мощные и селективные ингибиторы бутирилхолинестеразы для когнитивного улучшения и нейропротекции [J]. Журнал медицинской химии, 2021, 64(10): 6856-6876.

Соответствующая серия продуктов:

BC0840 / BC0845 Карбоксилэстеразы (CarEНабор для анализа активности

BC2020 / BC2025 Ацетилхолинергическая * эстераза (AchE) Набор реагентов для обнаружения активности

BC2130 / BC2135 Кислотные фосфатазы в тканях и крови (АКПНабор для анализа активности

BC2140 / BC2145 Щелочные фосфатазы в тканях и крови (АПР/АЛПНабор для анализа активности

BC5970 / BC5975 Бутилилхолинергическая * эстераза (BchE) Набор реагентов для обнаружения активности

Бутилилжелчный * ингибитор эстеразы