Метод определения содержания кислоты в упаковке

Инструкция по набору для определения содержания кислоты

Микрометод

Номер груза:БЦ5845

спецификация100T/48S

Состав продукта: Перед использованием тщательно проверьте, соответствует ли объем реагента объему внутри бутылки, пожалуйста, свяжитесь с персоналом Solebal вовремя.

Составление раствора:

1. Реактор II: Добавьте 4 мл реагента I перед использованием, полностью растворите; Неоконченный реагент - 20°C для раздельного хранения4Неделя, избегайте повторного замораживания и таяния;

2. Реактор 3: Добавьте 2,36 мл дистиллированной воды полностью растворенной перед использованием, а затем медленно добавьте головку пистолета под уровень жидкости0,64 млКонцентрированная серная кислота, полностью смешанная; 2 - 8°C Можно сохранить4Неделя;

3. Реактор 4: Добавьте 15 мл дистиллированной воды для полного растворения перед использованием, а затем медленно добавьте головку пистолета под уровень жидкости15 мклКонцентрированная серная кислота, полностью смешанная; 2 - 8°C Можно сохранить4Неделя;

Рабочий раствор: перед использованием в соответствии с количеством образца в соответствии с реагентом III: реагент IV = 1 мл: 5 мл (всего)6 млА,40T)Соотношение смешивается и заканчивается в день после конфигурации;

5. Стандартные изделия: перед использованием добавьте 1.08 мл реагента полностью растворенный, приготовленный в 10 мкмоль / мл стандартного продукта для растительных кислот, 2 - 8°С сохраняется в течение 4 недель;

Состав стандартной продукции 250 нмоль / мл: 50 мкл 10 мкл / мл стандартной кислоты и 450 мкл дистиллированной воды смешиваются в 1 мкмоль / мл стандартной продукции (т. е. 1000 нмоль / мл); Дополнительно 250 мкл 1000 нмоль / мл стандартных и750 мкл дистиллированной воды, смешанной в 250 нмоль / мл стандартной кислоты, используется для стандартного определения трубки в приведенном ниже рабочем листе, в настоящее время используется.

Описание продукции:

Растительная кислота (Phytic acid), также известная как креатил гексафосфат, циклогексанол гексафосфат, широко распространена в эукариотах и играет ключевую роль во многих клеточных действиях, таких как поддержание неорганического фосфорного стабильного состояния, участие в передаче сигналов гормонов растений, участие в качестве вспомогательного фактора ферментаДНКРемонт,РНКРедактировать имРНКЭкспорт. Растительные кислоты являются основным источником фосфора во время прорастания и роста растений и широко распространены в растительных продуктах питания, таких как зерновые, бобовые, фрукты, овощи и сухофрукты.

При определенных условиях окружающей среды, ферменты могут разлагать натрий - имплантат (гексафосфат натрия) для получения неорганических фосфора и производных креатила, в кислых условиях неорганические фосфорные и молибденовые аммониевые красители реагируют, образуя синее молибденовое голубое вещество, которое имеет характерный пик поглощения на 700 нм, измеряя содержание неорганического фосфора, можно рассчитать содержание фитной кислоты.

Примечание: Перед экспериментом рекомендуется выбрать 2 - 3 образца с ожидаемой большой разницей для предварительного эксперимента.

Требуется оборудование и принадлежности:

Видимый спектрофотометр / энзимометр, криогенная центрифуга, водяная ванна/Температурные инкубаторы, аналитические весы, микростеклянные чашки/ 96Перфорационная пластина, регулируемый дренажный пистолет, ступа/Амортизаторы,концентрированная серная кислота（> 98%А,AR)Лед и дистиллированная вода.

Шаги действия:

I. СОДЕРЖАНИЕОбработка образцов(Количество выборки, подлежащей измерению, может быть соответствующим образом скорректировано, конкретные пропорции могут быть указаны в литературе)

1. Образцы свежих растений: по массе (g): один объем экстракта(мл)за1А.5 ~ 10Доля (рекомендованная0.1gПРИСОЕДИНЕНИЕ, ПРИСОЕДИНЕНИЕ1 млЭкстракт 1) Добавьте экстракт 1, после полного равномерного раствора, вибрация при комнатной температуре2 часаЗатем в4℃А,10000gЦентрифугирование10 минут， 取0,8 млРастворить жидкость и медленно добавлять0,15 млЭкстракт 2, медленно дующий и смешанный до образования пузырьков,4 ℃ 10000гЦентрифугирование10 минутПосле этого будет проведена проверка.

2. Образцы сухих порошковых растений: по массе (g): один объем экстракта(мл)за1А.5 ~ 20Доля (рекомендованная0.05gПРИСОЕДИНЕНИЕ, ПРИСОЕДИНЕНИЕ1 млЭкстракт 1) Добавьте экстракт 1, после полного равномерного раствора, вибрация при комнатной температуре2 часаЗатем в4℃А,10000gЦентрифугирование10 минут， 取0,8 млРастворить жидкость и медленно добавлять0,15 млЭкстракт 2, медленно дующий и смешанный до образования пузырьков,4 ℃ 10000гЦентрифугирование10 минутПосле этого будет проведена проверка.

Образец жидкости: взять 100 мкл жидкости для добавления1 млЭкстракт один, вибрация при комнатной температуре2 часаЗатем в4℃А,10000gЦентрифугирование10 минут， 取0,8 млРастворить жидкость и медленно добавлять0,15 млЭкстракт 2, медленно дующий и смешанный до образования пузырьков,4 ℃ 10000гЦентрифугирование10 минутПосле этого будет проведена проверка.

Примечание:Экстракт IIНеобходимо медленно добавлять, после добавления образуется большое количество пузырьков, рекомендуется использовать2Трубка ML EP работает.

II. Этапы измерения

1. Предварительное нагревание спектрофотометра / энзимометра30 минутВыше, регулируйте длину волны до700 нмВидимый спектрофотометр, дистиллированный водоизмещение ноль.

2. Таблица действий: (Добавить в трубку 1.5 mLEP следующие реагенты)

III. Расчет содержания кислот

1. Рассчитано по концентрации белка в выборке

Содержание кислоты (nмоль/мг прот)*ΔА - определение× СметкаЧжиΔСтандарт A× ВА÷(В)А×Cpr) = 250×ΔА - определениеЧжиΔСтандарт A÷Cpr

2. Расчет по качеству выборки

Содержание кислоты (nКачество моль / г)*ΔА - определение× СметкаЧжиΔСтандарт A×(В)Шанцин+ ВЭкстракт II÷(В×В)ШанцинВЭкстракт один.)

= 296.875×ΔА - определениеЧжиΔСтандарт A÷W

3. По объему жидкости

Содержание кислоты (nмоль/мл)*ΔА - определение× СметкаЧжиΔСтандарт A×(В)Шанцин+ ВЭкстракт II÷[В]жидкость× ВШанцин÷(В)Экстракт один.+ Вжидкость)]

= 3265.625×ΔА - определениеЧжиΔСтандарт A

Критерий C: стандартная концентрация в трубке, 250nmol/mL； V - образный: добавить объем выборки,0,12 млv верхняя очистка: объем очищающей жидкости при извлечении,0,8 мл*VЭкстракт II: Добавьте объем экстракта II,0,15 мл*VЭкстракт один: добавьте экстракт один объем,1 мл; Cpr: концентрация белка в выборке,мг/мл; V жидкость: объем жидкого образца,0,1 мл; W: Качество выборки,gА.

Внимание:

1 ЕслиАA Измерение меньше0.010Или измерить значение поглощения трубки близко к пустой трубке, вы можете увеличить количество выборки, прежде чем измерить; ЕслиАА измерение больше1Рекомендуется очистить образец от дистиллированной воды, после того как она будет надлежащим образом разбавлена для измерения. Обратите внимание на синхронное изменение формулы расчета.

Если после добавления образца в рабочую жидкость появляется муть, рекомендуется очистить образец от дистиллированной воды, а затем измерить. Обратите внимание на синхронное изменение формулы расчета.

Экстракт I содержит белковый осадитель, поэтому очищающая жидкость не может быть использована для определения концентрации белка. Для определения содержания белка необходимо взять другой образец.

Примеры экспериментов:

1. утверждает, что взять образец лука в размере 0.1044 г, в соответствии с этапами извлечения и измерения, используя96Расчет диафрагмы:ΔА - определение= Аопределение- Аконтроль= 0.411 - 0.375 = 0.036А,ΔСтандарт A= Астандарт- Апустота= 0.811 - 0.096 = 0.715Рассчитано по качеству выборки:

Содержание кислоты (nКачество моль / г)= 296.875×ΔА - определениеЧжиΔСтандарт A÷W=143,18nКачество моль / г.

2. Предположительно взять 0,05 г пшеничной муки, в соответствии с этапом извлечения и этапом измерения, используя96Расчет диафрагмы:ΔА - определение= Аопределение- Аконтроль= 0.331 - 0.188 = 0.143А,ΔСтандарт A= Астандарт- Апустота= 0.811 - 0.096 = 0.715Рассчитано по качеству выборки:

Содержание кислоты (nКачество моль / г)= 296.875×ΔА - определениеЧжиΔСтандарт A÷W=1187,5nКачество моль / г.

Ссылки:

[1] Senna R, Simonin V, Silva-Neto M A C, et al. Индукция активности кислотной фосфатазы во время процветания семян кукурузы (Zea mays). [J]. Физиология растений и биохимия, 2006, 44(7-9):467-473.

[2] Iqbal T H, Lewis K O, Cooper B T. Активность фитазы в тонком кишечнике человека и крысы [J]. Gut, 1994, 35(9):1233-1236.

[3] Azeke M A, Egielewa S J, Ihimire E. Влияние процветания на активность фитазы, фитат и общее содержание фосфора риса (Oryza sativa), кукурузы (Zea mays), проса (Panicum miliaceum), сорга (Sorghum bicolor) и пшеницы (Triticum aestivum) [J]. Журнал Food Science & Technology, 2011.

Соответствующая серия продуктов:

BC3610 / BC3615 Щелочные древесные полигликозы (БАКСНабор для анализа активности

BC2540 / BC2545 Наборы для обнаружения активности целлюлозы (CL)

BC0360/BC0365 β-1, 3 Глюкозы (β-1,3-ГАНабор для анализа активности

BC3140 / BC3145 Наборы для определения активности ферментов

Метод определения содержания кислоты в упаковке Метод определения содержания кислоты в упаковке