DH5a Чувствительные клетки

DH5a Чувствительные клетки

Производитель: DH5a Chemically Competent Cell

Код продукта: G6016

Условия сохранения: - 80°C

Номер, количество, спецификация: G6016 - 20 (20 штук 100u1), G6016 - 100 (100 штук 100u1).

pUC19 (контрольный вектор) 10pg/ μ 1; 10μ 1

Генотип

F-φ80 лак ZАМ15А(lacZYA-arg F) U169 endAl recAl

hsdR17 (rk-, mk+) supE44 λ- thi -1 gyrA96 relAl phoA

Описание операции.

1. CLBioDH5a Чувствительные клеткиПоместите лед, чтобы расплавиться (или отпустить сердце или комнатную температуру на мгновение, когда грибок быстро вставляется в лед, когда он смешивается со льдом), добавьте целевую ДНК (плазмиды или продукты соединения) и ударьте рукойНижняя часть трубки EP слегка перемешивается и остается на льду в течение 25 минут.

2.42°C водяная ванна нагревается в течение 45 секунд, быстро возвращается на лед и остается в течение 2 минут, качание снижает эффективность преобразования.

Добавление 700 мк1 стерильной среды без антибиотиков (2YT или LB) в центрифужную трубку после усвоения при 37°C, 200 rpm восстановление в течение 60 минут.

4.5000rpm центробежный сбор бактерий в минуту, оставляя около 100 мк1, мягко вдувает тяжелые суспензионные блоки и наносит на питательную среду 2YT или LB, содержащую соответствующие антибиотики.

5. Поместите планшет в инкубатор 37°C для выращивания на ночь. Если выполняется операция скрининга сине - белых пятен, планшет помещается на 37 °C для культивирования не менее 17 часов.

Меры предосторожности

Чувствительные клетки CLBioпредложениеТают на льду. Помещение на лед около 5 минут, чтобы расплавиться, добавьте плазмиды в течение 8 минут после таяния, иначе это повлияет на эффективность преобразования.

2. При смешивании плазмиды или соединительных продуктов следует применять мягкий режим.

Преобразование высококонцентрированных плазмид или высокоэффективных соединений может привести к соответствующему сокращению количества бактерий, которые в конечном итоге используются для нанесения покрытий.