H9C2 Клетки сердечной мышцы крыс

Клетки сердечной мышцы крысы H9C2

L клеточная идентификация

Квалификация прошла.

L Источник клеток

Национальный банк ресурсов

L Клеточный фон

В. Kimes and B. Brandt клонировали штамм H9c2 (2 - 1) из клонированных штаммов, полученных из эмбриональной ткани сердца крыс BD1X, которые демонстрируют свойства многих скелетных мышц. Мышечные клетки в этом клеточном штамме могут сливаться, чтобы сформировать многоядерную трубку и реагировать на стимуляцию ацетилхолина. Если концентрация сыворотки в питательной среде снижается до 1%, слияние происходит быстро.

L - клеточные свойства

1) Источник: сердце

2) Формы: мышечные клетки, рост на стенках

3) Содержание: > Количество клеток 1x106

4) Технические характеристики: T25 или 1 мл упаковка для замороженных труб

5) Применение: только для научного использования.

l Условия культивирования:

1) Приготовить питательную среду DMEM (содержит 1.5 г / L NAHCO3 Рекомендация: awcell - 128 - 0001) или (GIBCO, Товар № 12800017, Добавить NAHCO3 1.5 г / L); Качественная сыворотка коровьего скота для плода, 10%; Двойное сопротивление 1%.

2) условия культивирования: газовая фаза: воздух, 95%; Углекислыйгаз, 5%. Температура: 37 градусов Цельсия, влажность инкубатора 70% - 80%.

l Внимание:

Примечание: Клетки сердечной мышцы крыс H9C2 Эта клетка хорошо растет в среде DMEM (с содержанием 1,5 г / LNAHCO3), и большинство брендов DMEM содержат более высокие концентрации NaHCO3 (3,7 г / L), которые требуют повышения концентрации CO2 (7 - 10%) при культивировании клеток с использованием среды DMEM (3,7 г / L NAHCO3).

Для клеточной транскрипции стенки можно использовать следующие методы:

1. Выбросить культуру верхней очистки и промыть клетки 1 - 2 раза с помощью PBS, который не содержит ионов кальция и магния.

2. Добавьте 0,25% (w / v) поджелудочной протеазы - 0,53 мм EDTA в культурную бутылку (T25 бутылок 1 - 2 мл, T75 бутылок 2 - 3 мл), поместите в инкубатор 37°C для переваривания в течение 1 - 2 минут (трудно перевариваемые клетки могут надлежащим образом продлить время переваривания), затем наблюдайте пищеварение клеток под микроскопом, если большая часть клетки округлится и выпадает, быстро возьмите операционный стол, после нескольких ударов по питательной бутылке добавьте 3 - 4 мл питательной среды, содержащей 10 мс, чтобы прекратить пищеварение.

3. Аккуратно выровнять и высосать, центрифугировать 3 - 5 мин в условиях 1000 RPM, отбросить очищающую жидкость, добавить 1 - 2 мл питательной жидкости после дутья равномерно. Клеточная суспензия делится на новую бутылку T25 в соотношении 1: 2, добавляя 6 - 8 мл новой * питательной среды, настроенной в соответствии с требованиями инструкции для поддержания жизнеспособности роста клеток, последующая передача в соответствии с реальной ситуацией в соотношении 1: 2 ~ 1: 5.

3) Замораживание клеток: после получения клетки рекомендуется заморозить партию клеточных семян при культивировании первых трех поколений для последующего экспериментального использования.

l Формы перевозки:

Низкая температура: (1) 1 мл замороженной трубки упаковка сухого льда транспортировка, после получения 80 градусов холодильника после хранения на ночь в жидкий азот или прямое восстановление, если вы обнаружите, что сухой лед испаряется чистым, крышка замороженной трубки сброшена, повреждена и клетки загрязнены, пожалуйста, немедленно свяжитесь с нами.

При комнатной температуре (2) T25 бутылочки для восстановления выживших клеток при комнатной температуре отправляются, после получения, в соответствии с методом обработки после приема клеток.

● Биобезопасность:

Все клетки животных считаются потенциально биологически опасными и должны работать в рамках вторичной станции биобезопасности, и обратите внимание на защиту, и все отходы и сосуды, подвергшиеся воздействию этой клетки, должны быть стерилизованы, прежде чем они могут быть выброшены.

Рекомендуется всегда использовать защитные перчатки, одежду и защитные маски при восстановлении замороженных клеток. Примечание: Замораживающая трубка, погруженная в жидкий азот, просачивается и медленно заполняется жидким азотом. При размораживании жидкий азот превращается в газовую фазу, что может привести к взрыву контейнера или сдуванию его крышки опасной силой, что приведет к образованию летающих обломков, наносящих ущерб людям.