Эмбриональные клетки почек человека 293T

HEK - 293T Эмбриональные клетки почек человека

Эй, 293Т '293Т'.

L клеточная идентификация

Проверка STR прошла.

L Источник клеток

Национальный банк ресурсов

L Клеточный фон

Клетки HEK - 293T являются производными клеточной линии 293T (293tsa1609neo) (ATCC CRL - 11268). Клетки продолжают экспрессировать антиген SV40, который часто используется в транскрипционных экспериментах с высокой эффективностью транскрипции. (Транскрипция, как правило, покрыта 50% плотностью, после того, как клетка только что прикреплена к стенке чашки Петри (обычно 8 - 10 часов), вы можете выполнить транскрипцию)

L - клеточные свойства

1) Источник: Эмбриональные почки человека

2) Формы: образцы эпителиальных клеток, рост на стенке, слабая способность к стенке

3) Содержание: > Количество клеток 1x106

4) Технические характеристики: T25 или 1 мл упаковка для замороженных труб

5) Применение: только для научного использования

l Условия культивирования:

1) Подготовка среды DMEM (рекомендуемая awcell - 0001); Качественная сыворотка коровьего скота для плода, 10%; L - глутамин (2 мм) 1%; NEAA 1% ； Двойное сопротивление 1%

2) условия культивирования: газовая фаза: воздух, 95%; Углекислыйгаз, 5%. Температура: 37°C, влажность инкубатора 70% - 80%.

l Внимание:

Клетки представляют собой суспензионные и слегка прикрепленные к стенке клетки, которые могут быть переданы со ссылкой на следующие методы:

Сбор: Сбор взвешенных клеток в бутылке с культурой в центрифужную трубку. Промыть клетки PBS без ионов кальция и магния 1 - 2 раза. Поскольку клетки плохо прикрепляются к стенкам, клетки после промывки PBS выпадают, поэтому PBS также перерабатывается в центробежные трубки.

Добавьте 0,25% (w / v) поджелудочной протеазы - 0,53 мм EDTA в культурную бутылку (T25 бутылок 1 - 2 мл, T75 бутылок 2 - 3 мл), помещенную в инкубатор 37°C для переваривания в течение 1 - 2 минут (трудно перевариваемые клетки могут надлежащим образом продлить время переваривания), затем наблюдайте пищеварение клетки под микроскопом, если большая часть клетки округляется и выпадает быстро, чтобы получить операционный стол, после нескольких ударов по бутылке добавьте 3 - 4 мл питательной среды, содержащей 10 мс, чтобы прекратить пищеварение.

3. Собранные суспензионные клетки, клетки в очищающем растворе pbs и переваренные клетки стенки в 1000 rpml центрифуг 5 мин, отбросить верхнюю очистку, добавьте 1 - 2 мл питательной жидкости после повторной суспензии и перемешайте ее в новую бутылку T25 в соотношении 1: 2, добавьте 6 - 8 мл новой * питательной среды, настроенной в соответствии с требованиями инструкции для поддержания жизнеспособности роста клеток, последующая передача в соответствии с реальной ситуацией в соотношении 1: 2 - 1: 5.

Замораживание 293Т - клеток эмбриональных почек человека: после получения клеток рекомендуется заморозить партию клеточных семян при культивировании первых трех поколений для последующего экспериментального использования.

l Формы перевозки:

Низкая температура: (1) 1 мл замороженной трубки упаковка сухого льда транспортировка, после получения 80 градусов холодильника после хранения на ночь в жидкий азот или прямое восстановление, если вы обнаружите, что сухой лед испаряется чистым, крышка замороженной трубки сброшена, повреждена и клетки загрязнены, пожалуйста, немедленно свяжитесь с нами.

При комнатной температуре (2) T25 бутылочки для восстановления выживших клеток при комнатной температуре отправляются, после получения, в соответствии с методом обработки после приема клеток.

● Биобезопасность:

Все клетки животных считаются потенциально биологически опасными и должны работать в рамках вторичной станции биобезопасности, и обратите внимание на защиту, и все отходы и сосуды, подвергшиеся воздействию этой клетки, должны быть стерилизованы, прежде чем они могут быть выброшены.

Рекомендуется всегда использовать защитные перчатки, одежду и защитные маски при восстановлении замороженных клеток. Примечание: Замораживающая трубка, погруженная в жидкий азот, просачивается и медленно заполняется жидким азотом. При размораживании жидкий азот превращается в газовую фазу, что может привести к взрыву контейнера или сдуванию его крышки опасной силой, что приведет к образованию летающих обломков, наносящих ущерб людям.