альфа - кетонадегидрогеназа

альфа-Дегидрогеназа (α-КГДХИнструкция по набору для обнаружения активности
Микрометод
Примечание: Реактор данного продукта изменен, обратите внимание и действуйте строго в соответствии с этой инструкцией.
артикулА.БЦ0715
спецификацияА.100T/96S
Состав продукта: Перед использованием тщательно проверьте, соответствует ли объем реагента объему внутри бутылки, пожалуйста, свяжитесь с персоналом Solebal вовремя.

Составление раствора:

1. Реактор II: для летучих реагентов, как можно скорее после окончания герметизации, сохранение - 20°C;

2. Реактор 5: Возьмите 1 реагент 5 перед использованием, добавьте1МЛ реагент III, полностью растворенный, нескончаемый реагент2 - 8℃сохранить4Неделя;

3. Реактор 6: Возьмите 1 реагент 6 перед использованием, добавьте1.5МЛ реагент III, полностью растворенный, нескончаемый реагент20°C Хранение в упаковке4Неделя, избегайте повторного замораживания и таяния;

4. Реактор VII: Возьмите один реагент VII перед использованием, добавьте1МЛ реагент III, полностью растворенный, нескончаемый реагент20°C Хранение в упаковке4Неделя, избегайте повторного замораживания и таяния (можно сделать после растворения 1 порошка100TЧтобы продлить время использования, этот продукт дает больше1Порошковые средства);

5. Реактор VIII: Возьмите один реагент VIII перед использованием, добавьте0,4 млДистиллированная вода, полностью растворенная, нескончаемый реагент-20℃Хранение раздельной сборки4Неделя, избегайте повторного замораживания и таяния;

6. Приготовление рабочей жидкости: перед вводом в эксплуатацию принимайте последовательно 8.05МЛ реагент 3,0.2 млРеактор 4, 1млРеактор V, 1.25млРеактор VI, 0,5млРеактор 7.(Всего11мл, Ио55T)Полностью смешивается для использования, в настоящее время используется существующее распределение.

Описание продукции:
α-КГДХ(EC 1.2.4.2Широко распространен в митохондриях животных, растительных микроорганизмов и культивирующих клеток, является одним из ключевых ферментов для регулирования циркуляции трикарбоновых кислот, катализируетальфа-Оксид декарбоксида кетонатаAА.
α-КГДХКатализацияальфа-Кетоглутаминовая кислота,НАД⁺И вспомогательный * А образует янтарь *AУглекислыйгаз иНАДХА,НАДХв340 нмЕсть характерные пики поглощения, чтобыНАДХСкорость генерацииα-КГДХАктивность.

Примечание: Перед экспериментом рекомендуется выбрать 2 - 3 образца с ожидаемой большой разницей для предварительного эксперимента. Если значения поглощения проб не входят в диапазон измерений рекомендуется разбавить или увеличить количество проб для проверки.
Требуется оборудование и принадлежности:
Ультрафиолетовый спектрофотометр / энзимометр, водяная ванна/Термотермический инкубатор, настольная центрифуга, регулируемый переносчик жидкости, микрокварцевый колориметр/ 96дыраУФПластина, ступа/Амортизаторы, лед и дистиллированная вода.
Шаги действия:Конкретные этапы эксплуатации подробно описаны в приложении "Информация о продукции"

1. Все реагенты и образцы в процессе измерения помещаются на лед, чтобы избежать дегенерации и инактивации.

2. Температура реакционной жидкости в чашке Петри должна поддерживаться на уровне 37°C или25℃Возьмите маленькие стаканчики и наполните их определенным количеством.37℃или25℃Дистиллированная вода, поместите этот стакан в37℃или25℃В водяной ванне. Во время реакции в стакан помещается чашка Петри с реакционной жидкостью.

3. Лучше всего, чтобы этот эксперимент проводили два человека одновременно, один по сравнению с цветом, и один по хронометражу, чтобы гарантировать точность результатов эксперимента.

4. измерительныйΔАЗначение0.01 - 0.25Между, если измерить трубкуΔАЗначение больше0.25Необходимо разбавить образец.

5. Поскольку экстракт содержит определенную концентрацию белка (около 1 мг / мл), содержание белка в самом экстракте необходимо вычесть при определении концентрации белка в образце.

Примеры экспериментов:

1. Возьмите 0,1 г травы для обработки пробПосле размягчения в 2 раза.Действуя в соответствии с порядком измерений, измеренный с помощью микрокварца и цветной чашки ПетривычислениеΔАопределение=A4-A3=0.3243-0.3115=0.0128А,ΔАпустота=A2-A1=0，По массе выборки фермент выживает:

α-КГДХАктивность(Качество U / g)= 1488,5×(ΔА)определение-ΔАпустота÷W×2(Разбавленное кратное)=381.056 U/gКачество.

1. Возьмите 0,1 г печени мыши для обработки образцов,4°C 11000g центрифуга10 минутПосле чисткиДействуя в соответствии с порядком измерений, измеренный с помощью микрокварца и цветной чашки ПетривычислениеΔАопределение=A4-A3=1.2123-0.9623=0.2500А,ΔАпустота=A2-A1=0，По массе выборки фермент выживает:

α-КГДХАктивность(Качество U / g)= 1488,5×(ΔА)определение-ΔАпустота÷W = 3721,25 U/gКачество.
Соответствующие публикации:

1. Цзяньюнь Юэ, Чанчзянь Ду Цзин Ji, et al. Ингибирование Активность альфа-кетоглутаратной дегидрогеназы влияет на случайный рост корней в топол через изменения в Шунт ГАБА. Планта. июль 2018 года; (IF3.06)

2. Xiao Li, Qi Zhao, Jianni Qi, et al. lncRNA Ftx способствует аэробному гликолизу и прогрессированию опухоли через путь PPARγ в гепатоцеллюлярной карциноме. Международный журнал онкологии. май 2018 года; (IF3.571)

Ссылки:
Park L C H, Calingasan N Y, Sheu K F R, et al. Количественное окрашивание активности альфа-кетоглутарной дегидрогеназы в секциях мозга и в культивированных клетках [J]. Аналитическая биохимия, 2000, 277(1): 86-93.
Соответствующая серия продуктов:
БЦ2150/БЦ2155 Набор для определения содержания лимонной кислоты (CA)
БЦ0950/БЦ0955 Набор для определения активности дегидрогеназы янтарной кислоты (SDH)
БЦ0380/БЦ0385 Реактор для определения активности дегидрогеназы пировиноградной кислоты (PDH)
БЦ2160/БЦ2165 митохондриальный изолимонад дегидрогеназа (ICDHm)

альфа - кетонадегидрогеназа альфа - кетонадегидрогеназа