Ацетилдана (Ахе)Описание комплекта для определения активности

Микрометод 100T/96S

Обязательно перед официальным тестированием. 2 - 3 Прогнозы по выборке с большой разницей.Измерение значения:

Ахе Принадлежит к нитрату гидролиза, который широко распространен в различных тканях животных и сыворотках крови.Ахе Каталитическая (Ах)Гидролиз, вВажную роль играет нейротрансмиссия.

Принцип измерения:

АхеКатализацияАхГидролиз образует Дан - щелочь, Дан - щелочь и дисульфид - парабензойную кислоту(DTNB)Генерирование действия 5 - -Тиогликол-Нитробензойная кислота(TNB)* ТНБв 412 нмЕсть пик абсорбции, измеряемый 412 нмСкорость увеличения поглощения, вычисление АхеАктивность.

Набор реагентов для определения активности ацетилдан - щелочной эстеразы серии P450

Состав:

Реактор 3: порошок× 1 Поддержка,4℃Сохранить. Присоединяйтесь перед началом использования 1.3 мл Реактор 2, полное сотрясение растворяется.Реактор 4: порошок× 1 Поддержка,4℃Сохранить. Присоединяйтесь перед началом использования 1.3 мл Реактор 2, полное сотрясение растворяется.

Параметры конкретного продукта зависят от параметров полученного описания продукта

Собственные приборы и принадлежности:

видимый спектрофотометр/Ферментометр, микрокварцевый колориметр/ 96 Дифференциальные пластины, криогенные центрифуги, водяные котлы, регулируемые переносчики и дистиллированная вода.

сырой ферментЭкстракция жидкостиА.

1. Организация: по качеству организации (g): Один объем реагента(мл)за 1А.5 ~ 10Доля (Рекомендуется заключить договор 0.1gОрганизация, присоединение 1 млРеакторi) равномерное растворение в ледяной ванне,8000г 4 ℃Центрифугирование 10 минутВозьмите очищающую жидкость, которая будет проверена.

2. Бактерии, грибки: по количеству клеток (10⁴ 1): Один объем реагента (мл)за 500 ~ 1000А.1 Доля (предложение 500 Миллионы клеток плюсБ 1 мл Реактор 1),Ультразвуковое дробление клеток в ледяной ванне (мощность 300wУЗИ, УЗИ 3 Секунда, интервал 7 Секунда, общее время 3 минуты)& Затем 8000gА, 4℃Центрифуга 10 минутВзять чистку и поместить на лед для проверки.

3. Сыворотка и другие жидкости: прямое определение.

Операции измерения:

1. спектрофотометр/подогрев энзимометра 30 минРегулируйте длину волны до 412 нмДистиллированная вода настроена на ноль.

2. Реактор 2. 37℃подогрев в водяной бане 30 минутА.

3. Взять микрокварцевую чашку/ 96 Перфорационная пластина, последовательно добавляется 20 мклЧистая жидкость,160 мклРеактор второй,10 мкл Реактор 3 и 10 мклРеактор 4, быстро смешиваетсяравномерно, в412 нм определение места3 минуты Изменение величины внутреннего поглощения, п.10-х Значение поглощения записывается какA1， 第190s Значение поглощения записывается какА2А.АA измерительная трубка= А2-А1А. АхеРасчет активности:

а.Используя микрокварцевую колориметрию, формула вычисления выглядит следующим образом:

1. ОрганизацияАхе Активность

（1）По концентрации белка.

Определение активной единицы: каталитическая выработка на миллиграмм белка в минуту 1нмоль ТНБ Количество ферментов является 1 Активная единица фермента.

Ахе Ферментная активность(нмоль/мин/мг) Прот) =АA ÷ε÷d×V Контр - генеральныйх 10⁹) Цуй(КПР × В образец)÷Т

* 245×АА÷Cpr

（2）По качеству выборки

Определение активной единицы: каталитическое образование на грамм ткани в минуту 1нмоль ТНБ Количество ферментов является 1 Активная единица фермента.

Ахе Ферментная активность(нмоль/мин/г) Свежий вес) =АA ÷ε÷d×V Контр - генеральныйх 10⁹) Цуй(W × В образецВ Тип в целом)÷Т

*245×АА÷В

2. Бактерии, клеткиАхе Активность

Определение активной единицы: каждый 10⁴ Каждую минуту клетки катализируют 1нмоль ТНБ Количество ферментов является 1 Активная единица фермента.

Ахе Ферментная активность(нмоль/мин/10)⁴ клетка) =АA ÷ε÷d×V Контр - генеральныйх 10⁹) Цуй(Количество клеток× В образецВ Тип в целом)÷Т

*245×АА ÷Количество клеток

3. СывороткаАхе Активность

Определение активной единицы: каталитическая выработка на миллилитр сыворотки в минуту 1нмоль ТНБ Количество ферментов является 1 Активная единица фермента.

Ахе Ферментная активность(нмоль/мин) /мл) =АA ÷ε÷d×V Контр - генеральныйх 10⁹÷V образец÷Т

= 245×АA

εА.ТНБМолярный коэффициент экстинкции,13.6×10³ л/моль/см*d: Световой диаметр чашки Петри,1 см*VОбщий объем реакционной системы (L), 200 мкл = 2 × 10^-4L*V Общая выборка: объем экстракта,1 мл*10⁶А.1 моль = 1 × 10⁶мкмоль*КПРКонцентрация белка (мг/мл);V Образец: Добавить объем очищающей жидкости (мл),0.02 ml*W : Качество образцов;TВремя реакции (мин),3 минутыА.

b.использовать 96 Расчетная формула, измеренная диафрагмой, выглядит следующим образом.

1. ОрганизацияАхе Активность

（1）По концентрации белка.

Определение активной единицы: каталитическая выработка на миллиграмм белка в минуту 1нмоль ТНБ Количество ферментов является 1 Активная единица фермента.

Ахе Ферментная активность(нмоль/мин/мг) Прот) =АA ÷ε÷d×V Контр - генеральныйх 10⁹) Цуй(КПР × В образец)÷Т

* 490×АА÷Cpr

（2）По качеству выборки

Определение активной единицы: каталитическое образование на грамм ткани в минуту 1нмоль ТНБ Количество ферментов является 1 Активная единица фермента.

Ахе Ферментная активность(нмоль/мин/г) Свежий вес) =АA ÷ε÷d×V Контр - генеральныйх 10⁹) Цуй(W × В образецВ Тип в целом)÷Т

* 490×АА÷В

2. Бактерии, клеткиАхе Активность

Определение активной единицы: каждый 10⁴ Каждую минуту клетки катализируют 1нмоль ТНБ Количество ферментов является 1 Активная единица фермента.

Ахе Ферментная активность(нмоль/мин/10)⁴ клетка) =АA ÷ε÷d×V Контр - генеральныйх 10⁹) Цуй(Количество клеток× В образецВ Тип в целом)÷Т

*490×АА ÷Количество клеток

3. СывороткаАхе Активность

Определение активной единицы: каталитическая выработка на миллилитр сыворотки в минуту 1нмоль ТНБ Количество ферментов является 1 Активная единица фермента.

Ахе Ферментная активность(нмоль/мин) /мл) =АA ÷ε÷d×V Контр - генеральныйх 10⁹÷V образец÷Т

= 490×АA

εА.ТНБ Молярный коэффициент экстинкции,13.6×10³ л/моль/см*dА.96 диаметр диаметра диска,0.5 см*V Общий объем реакционной системы (L), 200 мкл = 2 × 10^-4L*VОбщая выборка: объем экстракта,1 мл*10⁶А.1 моль = 1 × 10⁶мкмоль*КПРКонцентрация белка (мг/мл);VОбразец: Добавить объем очищающей жидкости (мл),0.02 ml*W : Качество образцов;TВремя реакции (мин),3 минутыА.

Набор реагентов для определения активности ацетилдан - щелочной эстеразы серии P450