ЦитохромБ5(цитохром Б5)Набор для определения содержания

Микрометод 100T/96S

Обязательно перед официальным тестированием. 2 - 3 Прогнозы по выборке с большой разницей.Измерение значения:

ЦитохромP450 Ферменты - это группа изоферментов, которые в основном присутствуют в печени и играют важную роль в метаболизме экзогенных веществ, особенно лекарств иМетаболизм яда. Цитохром P450 И цитохром.Б5 даP450 Два гемоглобина ферментативной линии, соотношение которых изменяется и P450 Поблагодарить за работуСекс тесно связан.

Принцип измерения:

Оксидный цитохром Б5 После восстановления Лианьея *, 424 нм Там самый большой пик абсорбции, измеренный 424 нм и 490 нм Разница в значениях поглощения может быть рассчитанавыходЦитохромБ5Содержание.

Набор для определения содержания цитохрома B5 серия P450

Состав:

Реактор один: порошок× 2 Бутылка,4℃Сохранить. Перед использованием добавить 100 мл Дистиллированная вода, полностью растворенная.

Приготовление рабочей жидкости:

Приготовлено перед использованием, наденьте одноразовые перчатки, осторожно откройте три крышки реагента, добавьте два 20 мл Полностью растворяется,4℃Свет можно сохранить 1 Неделя.

Параметры конкретного продукта зависят от параметров полученного описания продукта

Собственные приборы и принадлежности:

Обычная центрифуга, гиперцентрифуга, регулируемый дренажный пистолет, ультрафиолетовый спектрофотометр/Ферментометр, микростекло и чашка Петри/ 96 Дисковые пластины и параДистиллированная вода.

Цитохром в образце Б5 ИзвлечениеА.

1、Удаление больших молекулярных веществ, таких как ядро, митохондрии и т.п.:А 0.5g Организация, присоединение 1 мл Реактор один, полностью измельченный на льду,10 000g 4℃БСердце 30 минутВозьмите очищающую жидкость и перейдите в сверхскоростную центрифужную трубку.

2、Грубые микрочастицы:100 000gА,4℃Центрифугирование 60 минутБросьте очищающую жидкость.

3、Для удаления примесей, таких как гемоглобин:Шаги 2 Добавить в осадок 1 мл Реактор один, полностью сотрясающий растворенный после плотной крышки,100 000g Центрифугирование 30 минутБВерхняя жидкость.

4、Измеряемая жидкость:Шаги 3 Испытание в осадке 2. 0,5 млПосле плотной крышки полное сотрясающее растворение, то есть подлежащая измерению жидкость, которая должна быть измерена в тот же день.

Цитохром Б5 Операции определения содержания:

1. спектрофотометр/подогрев энзимометра 30 минА.

2. Рабочий раствор помещается 25℃подогрев в водяной бане 30 минА.

3. Пустая трубка:取 1 мл Стекло больше, чем чашка Петри, добавить 10 мкл Дистиллированная вода,200 мкл Рабочий раствор, статическое размещение при комнатной температуре 2 минА,424 нм и 490 нм ОтсосСветовые значения,424 нм Значение поглощения записывается какA Пустая трубка 1А,490 нм Значение поглощения записывается какA Пустая трубка 2А.АA Пустая трубка*A Пустая трубка 1-A ПустойБелая трубка 2

4. Измерительная трубка:取 1 мл Стекло больше, чем чашка Петри, добавить 10 мкл Догадывающаяся жидкость,200 мкл Рабочий раствор, статическое размещение при комнатной температуре 2 минА,424 нм и 490 нм ОтсосСветовые значения,424 нм Значение поглощения записывается какA измерительная трубка 1А,490 нм Значение поглощения записывается какA измерительная трубка 2А.

АA измерительная трубка*A измерительная трубка 1-A измерительная трубка 2А.

Внимание: Нужно сделать только пустую трубку.

Образцы цитохрома Б5 Формула расчета содержания:

а.Используя микрокварцевую колориметрию, формула вычисления выглядит следующим образом:

（1）По концентрации белка.

ЦитохромБ5 содержание(нмоль/мг) Прот) =АA измерительная трубка-АA Пустая трубка÷(ε×d) ×В Контр - генеральныйЧжи(Cpr × V образец)

*122.8× (АA измерительная трубка-АA Пустая трубка÷Cpr

（2）По качеству выборки

ЦитохромБ5 Содержание (нмоль/г Свежий вес)= (АA измерительная трубка-АA Пустая трубка÷(ε×d) ×В Контр - генеральныйХ(V Тип в целомВ образец)÷W

*61.4× (АA измерительная трубка-АA Пустая трубка÷W

ε: Восстановительный цитохромБ5 коэффициент экстинкции Намюра,171 х 10^-6 л/нмоль/см*dСветовой диаметр чашки (см),1 см* V Антиагрегация: общий объем реакционной системы,210 мкл = 2,1 × 10^-4 L*КПРКонцентрация белка, подлежащего измерению (мг/мл) Требуется дополнительное измерение;VОбразец: Добавьте объем жидкости, подлежащей измерению в реакционную систему,10 мкл = 0,01 мл*VОбщий объем образца: общий объем подлежащей измерению жидкости,0,5 мл*W:: Качество образцов (gВ)).

b.использовать 96 Расчетная формула, измеренная диафрагмой, выглядит следующим образом.

（1）По концентрации белка.

ЦитохромБ5 содержание(нмоль/мг) Прот) =АA измерительная трубка-АA Пустая трубка÷(ε×d) ×В Контр - генеральныйЧжи(Cpr × V образец)

*245,6 × (АA измерительная трубка-АA Пустая трубка÷Cpr

（2）По качеству выборки

ЦитохромБ5 Содержание (нмоль/г Свежий вес)= (АA измерительная трубка-АA Пустая трубка÷(ε×d) ×В Контр - генеральныйХ(V Тип в целомВ образец)÷W

*122.8× (АA измерительная трубка-АA Пустая трубка÷W

ε: Восстановительный цитохромБ5 коэффициент экстинкции Намюра,171 х 10^-6 л/нмоль/см*dА.96 Световой диаметр (см),0,5 см* V Антиагрегация: общий объем реакционной системы,210 мкл = 2,1 × 10^-4 L*КПРКонцентрация белка, подлежащего измерению (мг/мл) Требуется дополнительное измерение;VОбразец: Добавьте объем жидкости, подлежащей измерению в реакционную систему,10 мкл = 0,01 мл*VОбщий объем образца: общий объем подлежащей измерению жидкости,0,5 мл*W:: Качество образцов (gВ)).

Набор для определения содержания цитохрома B5 серия P450