Кислотные фосфаты (АКП)Описание комплекта для определения активности

Микрометод 100T/48S

Обязательно перед официальным тестированием. 2 - 3 Прогнозы по выборке с большой разницей.Измерение значения:

АКП Каталитический гидролиз моноэфира фосфатной кислоты в кислых условиях называется неорганической фосфатной кислотой и часто встречается в растворимых ферментах макрофагов.АКП Часто используется для дополнительной диагностики рака предстательной железы.

Принцип измерения:

В кислой среде,АКП каталитическое гидролизное образование нитробенфосфата натрия 4 -НитробенФел, в405нм Характерное поглощение света; Пройти измерениеБ405нмРастущая скорость поглощения, чтобы вычислитьАКПАктивность.

Кислотная фосфатаза (ACP) Набор реактивов для определения активности

Состав:

Собственные приборы и принадлежности:

Ферментометры,96 Перфорированные пластины, настольные центрифуги, водяные ванны, регулируемые переносчики и дистиллированная вода.

Параметры конкретного продукта зависят от параметров полученного описания продукта

Экстракция сырой ферментативной жидкости:

1. Организация: по качеству организации (g): Один объем реагента(мл)за 1А.5 ~ 10 Доля (Рекомендуется заключить договор 0.1g Организация, присоединение 1 мл Реакторi) равномерное растворение в ледяной ванне,4℃А10000gЦентрифугирование 10 минутВозьмите очищающую жидкость, которая будет проверена.

2. Бактерии или клетки: по количеству бактерий или клеток (10⁴ 1): Один объем реагента (мл)за 500 ~ 1000А.1 Доля (предложение 500 десять тысячКлетки присоединяются 1 мл Реактор один, ультразвуковое дробление клеток в ледяной ванне (мощность 300wУЗИ, УЗИ 3 Секунда, интервал 7 Секунда, общее время 3 мин);затем 10000gА,4℃Центрифуга 10 минутВзять чистку и поместить на лед для проверки.

3. Кровь может быть измерена непосредственно или после надлежащего разбавления.

Измерения:

1. подогрев энзимометра 30 минРегулируйте длину волны до 405 нмА.

2. в EP Добавить в трубку следующие реагенты

Смешивать, усваивать 200µL присоединиться 96 В конфуцианской доске,405 нм Измеряйте значения поглощения света в каждой трубке.ΔA=А измерительная трубка- А Уход за детьми.

Примечание: Каждая измерительная трубка должна быть выполнена по одному попечению.

АКП Расчет активности:

Стандартная кривая y *7.3336x +0.0179*R² *0.9996*x Стандартная концентрация (мкмоль/мл),y Для поглощенияΔАА.

1. В кровиАКП Расчет активности

Определение активной единицы:30℃Каждый миллилитр крови катализируется каждую минуту. 1 мкмоль 4 -Нитробензол определяется как 1 Активная единица фермента.

АКП 活力(мкмоль/мин/мл) =(ΔА-0,0179)Цуй 7.3336 × В Контр - генеральный÷ТВ образец

* 0.4545 Х(ΔА-0.0179)

2. В тканях, бактериях или клетках АКП Расчет активности

（1）По концентрации белка.

Определение активной единицы:30℃Каждый миллиграмм белка катализируется каждую минуту. 1 мкмоль 4 -Нитробензол определяется как 1 Активная единица фермента.

АКП 活力(мкмоль/мин/мг) Прот) =ΔA-0,0179)÷7,3336 ХV Контр - генеральный÷T÷(В) образец× Cpr)

= 0.4545 Х(ΔА-0,0179)÷Cpr

（2）По качеству выборки

Определение активной единицы:30℃Каждый грамм ткани катализирует каждую минуту 1 μ моль 4 -Нитробензол определяется как 1 Активная единица фермента.

АКП 活力 (мкмоль/мин/г) Свежий вес)=(ΔA-0,0179)÷7,3336 × В Контр - генеральный÷T÷(Ш×В) образецВ Тип в целом)

* 0.4545 Х(ΔА-0.0179)÷W

（3）По количеству бактерий или клеток.

Определение активной единицы:30℃Каждый 10⁴ Бактерии или клетки катализируют каждую минуту 1 μ моль 4 -Нитробензол определяется как 1 Активная единица фермента.

АКП 活力(мкмоль/мин/10)⁴ клетка) = (ΔA-0,0179) ÷7,3336 × В Контр - генеральный÷T÷(Количество клеток× В образецВ Тип в целом)

*0.4545 Х(ΔА-0,0179)ЧжиКоличество клеток

VОбщий объем реакционной системы (мл),1 мл* W : Качество образца,g* V Тип: Добавить объем образца в систему реакции(ml)А,

0,01 мл*V Общая выборка: объем экстракта,1 мл*TВремя реакции (мин),30 мин*500: общее количество клеток или бактерий,500 млн долл США.

Внимание:

АКП Нестабильность, особенно 37℃иpH Больше чем 7 В условиях быстрой потери жизнеспособности, поэтому образцы кислой фосфатазы обычно должны быть подготовлены в тот же день;В образцах сыворотки добавляют каждый миллилитр сыворотки 10 мгГидроксид натрия или 5 мгГидросульфат натрия,pHпонизить 6.5 Ниже, или 5 млкровьЧистое присоединение 30%ацетатный раствор 2...3 Капли, помещенные 4℃Можно сохранить 1 Неделя.

Кислотная фосфатаза (ACP) Набор реактивов для определения активности