Описание комплекта для определения содержания белка

Микрометод 100T/96S

Примечание: Выбор перед официальным измерением 2 - 3 Одна выборка с большой разницей в ожиданиях для прогнозирования, чтобы убедиться, что концентрация белка 1 ~ 10 мг / мл диапазонВнутри.

Измерение значения:

Содержание растворимого белка в образцах часто используется для расчета активности ферментов. Кроме того, содержание растворимого белка также используется для анализа качества, такого как продукты питания.

Принцип измерения:

В сильном щелочном растворе дифенилхлорид и CuSO4 Формирование фиолетовых комплексов; Глубина цвета фиолетового комплекса пропорциональна концентрации белка.Молекулярная масса белка и аминокислотный состав не имеют значения, поэтому их можно использовать для определения содержания белка. Этот метод определяет диапазон 1~10мг Белки, подходящие для образцов с высокой концентрацией белка, особенно животного материала.

Реактор для определения содержания белка в биуретине - постоянный спот

Состав:

Стандартная продукция: Жидкость 1 мл х 1 Бутылка,5 мг/мл, 4 ℃Сохранить.

Собственные приборы и принадлежностиА.

Центрифуга, видимый спектрофотометр/ Энзимометр, микрокварцевый колориметр / 96 Дистилляционная вода, диафрагменные пластины, переносчики и дистиллированная вода.

Параметры конкретного продукта зависят от параметров полученного описания продукта

Извлечение растворимых белков из образцов:

1 Образец жидкости:Образцы очищенной бесцветной жидкости могут быть измерены непосредственно.

2. Образец ткани:По качеству организации (g): Объем экстракта (мл)за 1: 5 - 10 Доля (Рекомендуется заключить договор 0.1g Организация, присоединение 1 млЭкстракт (собственный, по мере необходимости выбирайте ферменты для извлечения буфера или дистиллированной воды или физиологического раствора.))

Ледяные ванны равномерны,8000г, 4 ℃Центрифугирование 10min， Взять очищающий, то есть подлежащий измерению жидкость. (Образцы животных часто нуждаются в разбавлении.))

3 Бактерии, грибки: по количеству клеток (104):: Объем экстракта (мл)за Соотношение 500 - 1000: 1 (предложение Пять миллионов клетокприсоединиться 1 мл Экстракт), ультразвуковое дробление клеток в ледяной ванне (мощность 300wУЗИ, УЗИ 3 Секунда, интервал 7 Секунда, общее время 3 минуты);затем 8000g，

4℃Центрифуга 10 минутВзять чистку и поместить на лед для проверки.

Операции измерения:

1. спектрофотометр/подогрев энзимометра 30 минРегулируйте длину волны до 540 нмДистиллированная вода настроена на ноль.

2. Пустая трубка:取 0,5 мл EP Труба, присоединение 40 мкл Дистиллированная вода,200 мкл Реактор один, после смешивания комнатная температура статическая 15 мин， 取 200 мкл В микроСтеклянная чашка Петри/ 96 Дисковые пластины,540 нм Больше цвета, записывается какA Пустая трубка.

3. Стандартная трубка:取 0,5 мл EP Труба, присоединение 40 мкл Стандартная жидкость,200 мкл Реактор один, после смешивания комнатная температура статическая 15 мин， 取 200 мкл В микростеклянной чашке/ 96 диафрагма, 540 нмБольше цвета, записывается как Стандартная трубка А.

4. Измерительная трубка:取 0,5 мл EP Труба, присоединение 40 мкл Догадывающаяся жидкость,200 мкл Реактор один, после смешивания комнатная температура статическая 15 мин， 取 200 мкл В микроСтеклянная чашка Петри/ 96 Дисковые пластины,540 нм Больше цвета, записывается какA Измерительная трубка.

Примечание: Пустые и стандартные трубки должны быть измерены только один раз.

формула расчета концентрации белка в образцеА.

C Подлежит измерению (мг/мл)*C Стандартная трубка×(А) Измерительная трубка -A Пустая трубка÷(А) Стандартная трубка -A Пустая трубка)

= 5× (А) Измерительная трубка -A Пустая трубка÷(А) Стандартная трубка -A Пустая трубка)

Меры предосторожностиА.

1. Концентрация белка в образце должна быть 1 ~ 10 мг / млВ пределах, ниже 1 мг/млНельзя использовать этот метод, выше 10 мг / мл должно быть соответствующим образом разбавлено. Поэтому измерениеПредварительное использование Один - два.Один образец для предварительного эксперимента, чтобы убедиться, что концентрация белка в В пределах 1 - 10 мг / мл.

2. Для извлечения белка из проб, подлежащих тестированию, может использоваться физиологический раствор, двойной пар или без белка ПБС Извлечение. Закон содержит сульфат аммония,Трис Помехи буферной жидкости, подъёмЭти вещества не должны содержаться в жидкости; В противном случае переключитьсяНабор для определения содержания белка BCA.

Реактор для определения содержания белка в биуретине - постоянный спот