Карбонат (CarE)Описание комплекта для определения активности

Микрометод 100T/96S

Обязательно перед официальным тестированием. 2 - 3 Прогнозы по выборке с большой разницей.Измерение значения:

МлекопитающиеCarEОни также известны как липидные (альиестеразаШироко распространен в тканях и органах, принадлежит к семейству цианоагидразы.CarEКаталитический гидролиз эндогенных и экзогенных веществ, содержащих эфирные, амидные и сульфидные связи, но не гидролиз ацетилдана и его аналогов.CarE Участвует в транспортировке и метаболизме липидов и связан с детоксикацией и метаболизмом многих лекарственных средств, токсичных веществ окружающей среды и канцерогенов, фосфорорганических пестицидов может сочетаться иПодавлениеCarEАктивность.

Принцип измерения:

CarE Каталитическая уксусная кислота- 1 - -Нафталиновые эфиры образуют нафталиновые эфиры, твердые корзины имеют ярко выраженный цвет; в 450 нм Скорость увеличения поглощения света, вычислениеCarE Активность.

Набор для определения активности карбоксилацетазы (CarE)

Состав:

Реактор 3: порошок× 2 Поддержка, 4℃Сохранить, перед использованием взять 1 Реактор три, плюс 0,6 мл Безводный этанол полностью растворяется; Реактор 4: порошок× 2Поддержка,-20℃Сохранить, перед использованием взять 1 Реактор IV, плюс небольшое количество реагента II растворяется;

Приготовление рабочей жидкости: предэксплуатационная подготовка, в 1 В бутылке II добавьте растворенный реагент III и реагент IV 1 Подшипники, полностью растворенные, фильтрованные,4℃Светопоглощающее сохранение, доступно 1 Неделя.

Параметры конкретного продукта зависят от параметров полученного описания продукта

Собственные приборы и принадлежности:

Видимый спектрофотометр, настольная центрифуга, регулируемый переносчик жидкости,1 мл Стекло больше, чем чашка Петри, ступа, лед и дистиллированная вода.

Экстракция сырой ферментативной жидкости:

Подготовка образцов бактерий и клеток

Сбор бактерий или клеток в центрифужную трубку и их удаление после центрифугирования; В соответствии с каждым 200 Миллионы бактерий или клеток присоединяются 400 мкл Реактор 1, ультразвуковое дробление бактерий или клеток (мощность 20%, УЗИ 3сИнтервал, 10-хПовторить 30 Подпункт);12000г 4 ℃Центрифугирование 30 минутВозьмите очищающую жидкость, которая будет проверена.

2Организация: в соответствии с качеством организации (g): Один объем реагента(мл)за 1А.5 ~ 10 Доля (Рекомендуется заключить договор 0.1g Организация, присоединение 1 мл Реактор 1) равномерное растворение в ледяной ванне;12000г 4 ℃Центрифугирование 30 минутВозьмите очищающую жидкость, которая будет проверена.

3Жидкость: прямое определение

Операции измерения:

1. спектрофотометр/подогрев энзимометра 30 минутРегулируйте длину волны до 450 нмДистиллированная вода настроена на ноль.

2. Реактор 2. 37℃подогрев в водяной бане 30 минА.

3. Пустая трубка:Небольшое количество стекла/ 96 Перфорационная пластина, последовательно добавляется 5 мкл Дистиллированная вода и 200 мкл Реактор второй, быстро смешать, в 450 нм СекторБ 3 минутыИзменение величины внутреннего поглощения, п. 10-хЗначение поглощения записывается какА1， 第 190sЗначение поглощения записывается какА2А.АAПустая трубка= А2-А1

4. Измерительная трубка:Небольшое количество стекла/ 96 Перфорационная пластина, последовательно добавляется 5 мкл Жидкость и 200 мкл Реактор второй, быстро смешать, в 450 нм Сектор

Б 3 минуты Изменение величины внутреннего поглощения, п. 10-х Значение поглощения записывается какА3， 第 190s Значение поглощения записывается какА4А.АA измерительная трубка=A4-А3

Примечание: Пустую трубку нужно измерить только один раз.

CarE Формула расчета активности:

а.Используя микрокварцевую колориметрию, формула вычисления выглядит следующим образом:

1В организацииCarE Активность

（1）По концентрации белка.

CarE Определение активной единицы: каждыймг Органический белок в 37℃Каталитическое увеличение поглощения света в реакционной системе в минуту 1 Определение как 1 Активная единица фермента.

CarE Ферментная активность(U/мг) Прот) =АA измерительная трубка-АA Пустая трубка)× В Контр - генеральный÷(Cpr×V) образец÷T

*13.67 × (АA измерительная трубка-АA Пустая трубка÷Cpr

（2）По свежему весу выборки

CarE Определение активной единицы: каждыйg Организация в 37℃Каталитическое увеличение поглощения света в реакционной системе в минуту 1 Определение как 1 Активная единица фермента.

CarE Ферментная активность(U/г) Свежий вес) =АA измерительная трубка-АA Пустая трубка)× В Контр - генеральныйХ(V Тип в целомВ образец)÷W÷T

= 13,67 × (АA измерительная трубка-АA Пустая трубка÷W 2В бактериях или клеткахCarEАктивность

CarE Определение активной единицы: каждый 1 Миллионы бактерий или клеток 37℃Каталитическое увеличение поглощения света в реакционной системе в минуту 1 Определено какCarE Б

Сексуальные подразделения.

CarE Ферментная активность(U/10⁴ клетка) =АA измерительная трубка-АA Пустая трубка) ХV Контр - генеральныйХ(V Тип в целомВ Тип)ЧжиПлотность клеток (10⁴ клетка/мл)

÷T=13,67×(АA измерительная трубка-АA Пустая трубка) ЦуйПлотность клеток (10⁴ клетка/мл) 3В жидкостиCarEАктивность

CarE Определение активной единицы: на миллилитр образца 37℃Каталитическое увеличение поглощения света в реакционной системе в минуту 1 Определение как 1 Активная единица фермента.

CarE Ферментная активность(U/мл) ) =АA измерительная трубка-АA Пустая трубка)× В Контр - генеральныйВ образец÷Т

= 13,67 × (АA измерительная трубка-АA Пустая трубка)

V Антиагрегация: общий объем реакционной системы,205мкл = 2,05 × 10^-4L*V Общий объем образца: общий объем очищающей жидкости,1 мл*V Тип: Добавить объем очищающей жидкости(мл)А,

0.005 мл*КПР:: Концентрация белка,мг/мл*W:: Качество образцов (g);TВремя реакции (мин),3 минутыА.

b.использовать 96 Расчетная формула, измеренная диафрагмой, выглядит следующим образом.

1В организацииCarE Активность

（3）По концентрации белка.

CarE Определение активной единицы: каждыймг Органический белок в 37℃Каталитическое увеличение поглощения света в реакционной системе в минуту 1 Определение как 1 Активная единица фермента.

CarE Ферментная активность(U/мг) Прот) =АA измерительная трубка-АA Пустая трубка)× В Контр - генеральный÷(Cpr×V) образец÷T

*13.67 × (АA измерительная трубка-АA Пустая трубка÷Cpr

（4）По свежему весу выборки

CarE Определение активной единицы: каждыйg Организация в 37℃Каталитическое увеличение поглощения света в реакционной системе в минуту 1 Определение как 1 Активная единица фермента.

CarE Ферментная активность(U/г) Свежий вес) =АA измерительная трубка-АA Пустая трубка) ХV Контр - генеральныйХ(V Тип в целомВ образец)÷W÷T

= 13,67 × (АA измерительная трубка-АA Пустая трубка÷W 2В бактериях или клеткахCarEАктивность

CarE Определение активной единицы: каждый 1 Миллионы бактерий или клеток 37℃Каталитическое увеличение поглощения света в реакционной системе в минуту 1 Определено какCarE Б

Сексуальные подразделения.

CarE Ферментная активность(U/10⁴ клетка) =АA измерительная трубка-АA Пустая трубка)× В Контр - генеральныйХ(V Тип в целомВ Тип)ЧжиПлотность клеток (10⁴ клетка/мл)

÷T=13,67×(АA измерительная трубка-АA Пустая трубка) ЦуйПлотность клеток (10⁴ клетка/мл)

3. В жидкостиCarE Активность

CarE Определение активной единицы: на миллилитр образца 37℃Каталитическое увеличение поглощения света в реакционной системе в минуту 1 Определение как 1 Активная единица фермента.

CarE Ферментная активность(U/мл) ) =АA измерительная трубка-АA Пустая трубка)× В Контр - генеральныйВ образец÷Т

= 13,67 × (АA измерительная трубка-АA Пустая трубка)

V Антиагрегация: общий объем реакционной системы,205мкл = 2,05 × 10^-4L*V Общий объем образца: общий объем очищающей жидкости,1 мл*V Тип: Добавить объем очищающей жидкости(мл)А,

0.005 мл*КПР:: Концентрация белка,мг/мл*W:: Качество образцов (g);TВремя реакции (мин),3 минутыА.

Набор для определения активности карбоксилацетазы (CarE)