E14 Клеточная среда

Асептические операции ‌:Клеточная культура должна проводиться в стерильной среде, перед использованием ультрафиолетового облучения и стерилизации сверхчистого рабочего стола, а также регулярной очистки инкубаторов. Экспериментальные работники должны заменить комбинезоны, обувные чехлы, носить маски и перчатки.

• Стерилизация оборудования:Стеклянная посуда, металлическая посуда и т. Д. Можно использовать высоковольтную паровую стерилизацию, пластиковые изделия выбирают больше эпоксиэтана стерилизации или покупки стерилизованных продуктов.

Выбор реагентов ‌:Используемая питательная жидкость, сыворотка, буферная жидкость и другие реагенты должны быть стерильными, без загрязнения, перед использованием необходимо провести стерильное тестирование. Различные клетки имеют разные требования к составу питательной жидкости, и подходящую питательную жидкость следует выбирать по типу клетки.

• Условия культивирования:Большинство клеток млекопитающих пригодны для культивирования при температуре 37°C, а отклонение должно контролироваться на уровне ±0,5 °C. Цистерны должны поддерживать хорошую герметичность, регулярно проверять концентрацию и расход газа, а для культивирования клеток обычно требуется 5% CO2, чтобы поддерживать стабильность pH питательной жидкости. Влажность в инкубаторе должна быть около 95%.

АЕжедневные наблюдения:Каждый день под микроскопом наблюдаются изменения формы клеток, состояния роста и цвета питательной жидкости.

Регулярное тестирование ‌:Клетки регулярно проверяются на загрязнение, такое как микоплазма, бактерии и грибки.

Е14Клеточная среда

Описание продукта

Е14Клеточная среда состоит изКоманда тщательно оптимизирована, после длительного тестирования, этот продукт может быть сохраненКлетки E14 находятся в хорошем состоянии роста.

Данный продукт уже содержит Различные ингредиенты, необходимые для роста клеток E14, без добавления каких - либо компонентов, могут быть использованы непосредственно для культивирования клеток E14.

Основные компоненты продукции

Базовая среда DMEM 405 мл

Сыворотка крупного рогатого скота 75 мл

Перевозка и хранение

Перевозка: перевозка при низких температурах в инкубаторах, содержащих биологические мешки со льдом

Способ сохранения: 2°C - 8°C, избегание света, сохранение 2 месяцев; ׏

Внимание ограничивается научными целями.

Некоторые компоненты в системе культивирования являются вредными для здоровья человека веществами, и, пожалуйста, не прикасайтесь к жидкостям системы культивирования и остаткам жидкости с системой культивирования внутри контейнера с открытой кожей; Эта часть вредных веществ имеет низкую концентрацию и опасность, и в случае контакта ее можно немедленно промыть проточной водой.

Восстановление

1) подогревать воду в водяной ванне с постоянной температурой до 37°С;

2) Подготовьте 15 - миллиметровую центробежную трубку, добавьте 5 - миллиметровую питательную среду, содержащую 10% FBS, и поместите ее в водяную ванну 37°C для подогрева;

3) Наденьте защитные очки, толстые шерстяные перчатки, выньте из резервуара с жидким азотом, чтобы оживить клетку, как можно скорее в котел с водяной ванней с постоянной температурой 37°C

Повторная температура качает охлаждающую трубку, чтобы увеличить скорость восстановления;

4) вдыхание клеток из расплавленной замороженной трубки в заранее подготовленную центрифужную трубку, смешивание, 1000rpm центрифуга 5 мин;

5) Подготовьте бутылку Т - 25, напишите название клетки, дату и добавьте 4 мл питательной среды;

6) После завершения центрифугирования отбросить верхнюю очистку, после того, как 1 мл питательной среды перевешивает клетки, перейти в Т - 25 клеточную культуру, перемешать и перейти

СO2 культивируется в инкубаторах.

Передача поколений (клеточная передача рекомендуется 1 - 2)

1) Когда клеточная конвергенция достигает более 85%, может быть проведена передача.

2) В шкафу биологической безопасности, откройте отверстие бутылки для культивирования и соберите питательную среду в бутылке;

3) После добавления 3 мл стерильного 1 × PBS в бутылку для культивирования, поместите бутылку горизонтально, чтобы PBS мог проникать на всю площадь на дне бутылки для культивирования и высасывать PBS;

4) Добавьте 1 мл пищеварительного раствора в бутылку и поместите 1 - 2 мин в инкубатор CO2 при температуре 37°C после погружения в дно;

5) После завершения инкубации под перевернутым микроскопом наблюдать, кружится ли клетка, и, если все переваривается, добавлять 2 мл питательной среды, содержащей 10% FBS, непосредственно в питательную бутылку, всасывая суспензию в 15 мл центробежной трубки;

Приготовьте стерильную 15 - миллиметровую центрифужную трубку и добавьте 2 - миллиметровую питательную среду, содержащую 10% FBS;

(2) вдыхание переваренных клеток в центробежную трубку и нейтрализация (избегайте вдувания); Добавьте 1 мл в ранее переваренную бутылку с культурой, чтобы продолжать переваривать около 2 мин, похлопайте бутылку с культурой и снимите около 95% клеток.

6) 1000rpm центрифуга 5min;

7) Подготовьте две новые бутылки Т - 25, каждая с добавлением 4 мл питательной среды.

8) После завершения центрифугирования, отбросив очищение, повторно подвешивая центробежные клетки с помощью 2 мл питательной среды, повторно подвешенные клетки передаются в 2 бутылки Т - 25, каждая по 1 мл;

9) Горизонтально поместить бутылку для культивирования, сотрясение смешано, поместить бутылку для культивирования в 37°C, 5% инкубатора CO2 для статической культуры.

Замораживание (замораживание клеток рекомендуется по одной на бутылку T25)

1) ~ 6) Ссылка на этапы передачи

7) После завершения центрифугирования, после удаления и очистки, осаждается 1 мл замороженной жидкости с тяжелыми суспензионными клетками, а затем переходит в 1,8 мл замороженной трубки;

8) Поместить охлаждающую трубку в программный охладитель, заполненный изопропиловым спиртом, а затем в холодильник с температурой 80°C на ночь;

9) На следующий день вынуть охлаждающую трубку из серийной коробки охлаждения, которая была завершена охлаждением, и как можно скорее перевести в резервуар с жидким азотом для хранения.

Свиной тромборегулятор белка(TM) ELISAРеактор

Людский миозин (Myosin) ELISA KitМиогликулин человека(Миозин)Реактор

Протромбинфрагма1+2,F1+2ELISAKitКролик - оригиналF1+2(F1+2)Сборка комплектов

CLIAKitforAi-TMАнтитела микрочастиц щитовидной железы(ТМ)Антитела)

血小板因子4(Фактор тромбоцитов IV)Активная флуоресцентная дозировка20раз

Молекула адгезии клеток свиней 2, ICAM-2ELISAKitМежклеточная адгезия свиней2 (ICAM-2/CD102)Реактор

Синтетаза глютамида крыс(ГЛУЛ)Набор реагентов, Английское название:Комплект GLUL ELISA

Набор ELISA для кроликового эрлейкина 8 (IL-8/CXCL8)Белый мезон кролика8(ИЛ-8/КХСЛ8)Реактор

кишечная палочка(O157:H7)Ядерная кислота(ПЦР-флуоресцентный зонд) 48T

CLIAKitforMIP-1Beta/CCL4(человеческий макрофаговоспалительный белок-1Beta)ELISAkitМакрофаговые белки человека1бета

Гетеросоматический вирус косакиВ(вирус КоксаккиВ)Количественная оценкаПЦРНабор усилителей20раз

Элизабет 5 ночейСобака5Гидроксиламин

Свиной липопротеинB(Апо-БСборка комплектов/оригинальный

Свиной липопротеинА1(апо-А1)Сборка комплектов/оригинальный

Беременность свиней (ПРОГСборка комплектов/оригинальный

Свиной гормон (PСборка комплектов/оригинальный

5 - -Рецепторы трифосфата1Антитела

ЦиклинД2Антитела

ИЛ1Р2Реконструкция крысIL1R2 / IL1RB / CD121bбелок(Егометка) Белок

GRP94 (gp96) 0,5 мГРП94 (gp96) 94 кДаСахарорегулирующие белки(Антиген)

ANP32АРеорганизацияANP32A / PHAP1белок(Его & GSTметка) Белок

BLOC1S2 Белок ЧеловекРеорганизацияBLOC1S2 / Блос2белок(GST)метка)

PGLYRP1 Белок мышиРекомбинантные мышиPGLYRP1 / PGRP-Sбелок(ЕгоМ

Е14Клеточная средаGRP94 (gp96) 0,5 мГРП94 (gp96) 94 кДаСахарорегулирующие белки(Антиген)

BLOC1S2 Белок ЧеловекРеорганизацияBLOC1S2 / Блос2белок(GST)метка)

ИЛ1Р2Реконструкция крысIL1R2 / IL1RB / CD121bбелок(Егометка) Белок

PGLYRP1 Белок мышиРекомбинантные мышиPGLYRP1 / PGRP-Sбелок(Егометка)

ANP32АРеорганизацияANP32A / PHAP1белок(Его & GSTметка) Белок