Почечные клетки желтой рыбы; PCK

Почечные клетки желтой рыбы; Базы PCK были тщательно оптимизированы командой, и после длительных испытаний этот продукт может поддерживать отличный рост протолегких макрофагов у крыс.

Этот продукт уже содержит различные компоненты, необходимые для роста протолегких макрофагов у крыс, без добавления каких - либо компонентов, которые могут быть непосредственно использованы для культивирования протолегких макрофагов у крыс.

Меры предосторожности

Только для научных целей.

Некоторые компоненты в системе культивирования являются вредными для здоровья человека веществами, и, пожалуйста, не прикасайтесь к жидкостям системы культивирования и остаткам жидкости с системой культивирования внутри контейнера с открытой кожей; Эта часть вредных веществ имеет низкую концентрацию и опасность, и в случае контакта ее можно немедленно промыть проточной водой.

Восстановление

1) подогревать воду в водяной ванне с постоянной температурой до 37°С;

2) Подготовьте 15 - миллиметровую центробежную трубку, добавьте 5 - миллиметровую питательную среду, содержащую 10% FBS, и поместите ее в водяную ванну 37°C для подогрева;

3) Наденьте защитные очки, толстые шерстяные перчатки, выньте из резервуара с жидким азотом, чтобы оживить клетку, как можно скорее в котел с водяной ванней с постоянной температурой 37°C

Повторная температура качает охлаждающую трубку, чтобы увеличить скорость восстановления;

4) вдыхание клеток из расплавленной замороженной трубки в заранее подготовленную центрифужную трубку, смешивание, 1000rpm центрифуга 5 мин;

5) Подготовьте бутылку Т - 25, напишите название клетки, дату и добавьте 4 мл питательной среды;

6) После завершения центрифугирования отбросить верхнюю очистку, после того, как 1 мл питательной среды перевешивает клетки, перейти в Т - 25 клеточную культуру, перемешать и перейти

СO2 культивируется в инкубаторах.

Передача поколений (клеточная передача рекомендуется 1 - 2)

1) Когда клеточная конвергенция достигает более 85%, может быть проведена передача.

2) В шкафу биологической безопасности, откройте отверстие бутылки для культивирования и соберите питательную среду в бутылке;

3) После добавления 3 мл стерильного 1 × PBS в бутылку для культивирования, поместите бутылку горизонтально, чтобы PBS мог проникать на всю площадь на дне бутылки для культивирования и высасывать PBS;

4) Добавьте 1 мл пищеварительного раствора в бутылку и поместите 1 - 2 мин в инкубатор CO2 при температуре 37°C после погружения в дно;

5) После завершения инкубации под перевернутым микроскопом наблюдать, кружится ли клетка, и, если все переваривается, добавлять 2 мл питательной среды, содержащей 10% FBS, непосредственно в питательную бутылку, всасывая суспензию в 15 мл центробежной трубки;

Приготовьте стерильную 15 - миллиметровую центрифужную трубку и добавьте 2 - миллиметровую питательную среду, содержащую 10% FBS;

(2) вдыхание переваренных клеток в центробежную трубку и нейтрализация (избегайте вдувания); Добавьте 1 мл в ранее переваренную бутылку с культурой, чтобы продолжать переваривать около 2 мин, похлопайте бутылку с культурой и снимите около 95% клеток.

6) 1000rpm центрифуга 5min;

7) Подготовьте две новые бутылки Т - 25, каждая с добавлением 4 мл питательной среды.

8) После завершения центрифугирования, отбросив очищение, повторно подвешивая центробежные клетки с помощью 2 мл питательной среды, повторно подвешенные клетки передаются в 2 бутылки Т - 25, каждая по 1 мл;

9) Горизонтально поместить бутылку для культивирования, сотрясение смешано, поместить бутылку для культивирования в 37°C, 5% инкубатора CO2 для статической культуры.

Замораживание (замораживание клеток рекомендуется по одной на бутылку T25)

1) ~ 6) Ссылка на этапы передачи

7) После завершения центрифугирования, после удаления и очистки, осаждается 1 мл замороженной жидкости с тяжелыми суспензионными клетками, а затем переходит в 1,8 мл замороженной трубки;

8) Поместить охлаждающую трубку в программный охладитель, заполненный изопропиловым спиртом, а затем в холодильник с температурой 80°C на ночь;

9) На следующий день вынуть охлаждающую трубку из серийной коробки охлаждения, которая была завершена охлаждением, и как можно скорее перевести в резервуар с жидким азотом для хранения.

Рецепторы конечного продукта поздней гликолизации(AGER)Рекомбинантные белкиРекомбинантный рецептор, специфический для конечного продукта (AGER)

EPCAM Белок человекаРеорганизацияEpCAM / TROP-1 / TACSTD1белок

НРП1РеорганизацияНейропилин-1 / НРП1белок(ФК)метка) Белок

HA белок H1N1Рекомбинантный грипп АH1N1 (A/WSN/1933)ГемогенHA1 (гемаглутинин)белок

делатьРеорганизацияLALBA / Альфа-лактальбуминбелок(ФК)метка) Белок

Микрофаги крыс(GMCSF/CSF2)Реактор Английское название:Комплект ELISA GMCSF/CSF2

Аокринный фактор кератиноцитов мыши (KAF) ELISA Kit / амфирегулин (AR) ELISA KitЭндокринный фактор роговицы у мышей(КАФ)Реактор/Бициклин(AR)Реактор

Морфогенетические белки мыши, BMPsELISAKitОстеобразующие белки у мышей(БМП)Реактор96T/48TИмпортная разделка

CLIAKitforHumanpaxillin, PaxELISAKitПчелиный белок

Изотопы[γ32П]АТФКомплект реагентов для усиления микроспутников с маркировкой киназы20раз

ELISAKitPIAb-IgG/IgMКрысы0Антитела к липидомиолуИГГ/ИГМ

Мышиный трансфермент Мышиный трансфермент Тип спецификации:96T/48T Набор трансферментов для мышей, тип:96T/48TИсточник: Набор реагентов (импортная раздельная упаковка), продукт псевдоним: Набор реагентов для трансферментов мышей, Трансфермент для мышейЭйсаРеактор Условия сохранения:2 - 8℃ Срок годности:6Месяц.

Комплект для переноса ферментов на основе мышей Комплект для переноса ферментов на основе мышей Тип спецификации:96T/48T Набор для переноса ферментов на основе мышей, тип:96T/48TИсточник: Набор реагентов (импортная раздельная упаковка), продукт псевдоним: Набор реагентов для переноса ферментов на основе мышей, Трансфераза на основе мышейЭйсаРеактор Условия сохранения:2 - 8℃ Срок годности:6Месяц.

Набор реагентов для факторов роста кожи мышей Набор реагентов для факторов роста кожи мышей Тип спецификации:96T/48T Набор реагентов для факторов роста кожи мышей, модель:96T/48TИсточник: Набор реагентов (импортная упаковка), псевдоним продукта: Набор реагентов для факторов роста кожи мыши, фактор роста кожи мышиЭйсаРеактор Условия сохранения:2 - 8℃ Срок годности:6Месяц.

Набор для мышиных палочек Набор для мышиных палочек Тип спецификации:96T/48T Набор для мышей Bacillus Bacillus, модель:96T/48TИсточник: Набор реагентов (импортная раздельная упаковка), продукт псевдоним: Набор реагентов для мышиной палочки, мышиная палочкаЭйсаРеактор Условия сохранения:2 - 8℃ Срок годности:6Месяц.

Гексогеназа у мышей(HK) ELISAРеактор96T/48T

Комплект ELISA для сорбитольной дегидрогеназы человека (SDH)Дегидрогеназа человека(SDH)Реактор

Человеческая ДНАСвязывающий белок, DBPELISAKitчеловекДНКАссоциированные белки(ДБП)Реактор96T/48TИмпортная разделка

HumanAi-глюкопротеин210, GP210Человеческий антирибонуклеин210Антитела(gp210)Спецификации комплекта:96T/48T

Растительный гидроксилаза(лизилгидроксилаза)дозированный по методу активного колориметрического метода20раз

человеческий витамин АА,Сила тяги VaelisatчеловекА(ВА)Спецификации комплекта:96T/48T

PМатериальное антитело

Связанные адгезионные молекулы2Антитела

Почечные клетки желтой рыбы; PCKНРП1РеорганизацияНейропилин-1 / НРП1белок(ФК)метка) Белок

Рецепторы конечного продукта поздней гликолизации(AGER)Рекомбинантные белкиРекомбинантный рецептор, специфический для конечного продукта (AGER)

делатьРеорганизацияLALBA / Альфа-лактальбуминбелок(ФК)метка) Белок

EPCAM Белок человекаРеорганизацияEpCAM / TROP-1 / TACSTD1белок

HA белок H1N1Рекомбинантный грипп АH1N1 (A/WSN/1933)ГемогенHA1 (гемаглутинин)белок

Асептические операции ‌:Клеточная культура должна проводиться в стерильной среде, перед использованием ультрафиолетового облучения и стерилизации сверхчистого рабочего стола, а также регулярной очистки инкубаторов. Экспериментальные работники должны заменить комбинезоны, обувные чехлы, носить маски и перчатки.

• Стерилизация оборудования:Стеклянная посуда, металлическая посуда и т. Д. Можно использовать высоковольтную паровую стерилизацию, пластиковые изделия выбирают больше эпоксиэтана стерилизации или покупки стерилизованных продуктов.

Выбор реагентов ‌:Используемая питательная жидкость, сыворотка, буферная жидкость и другие реагенты должны быть стерильными, без загрязнения, перед использованием необходимо провести стерильное тестирование. Различные клетки имеют разные требования к составу питательной жидкости, и подходящую питательную жидкость следует выбирать по типу клетки.

• Условия культивирования:Большинство клеток млекопитающих пригодны для культивирования при температуре 37°C, а отклонение должно контролироваться на уровне ±0,5 °C. Цистерны должны поддерживать хорошую герметичность, регулярно проверять концентрацию и расход газа, а для культивирования клеток обычно требуется 5% CO2, чтобы поддерживать стабильность pH питательной жидкости. Влажность в инкубаторе должна быть около 95%.

АЕжедневные наблюдения:Каждый день под микроскопом наблюдаются изменения формы клеток, состояния роста и цвета питательной жидкости.

Регулярное тестирование ‌:Клетки регулярно проверяются на загрязнение, такое как микоплазма, бактерии и грибки.