Эмбриональные фибробласты зебры pac2

Название продукта: Эмбриональные фибробласты зебры Pac2

Категория продукта: Другие клеточные линии

Характеристики роста: рост на стенках

Система культивирования: L15 + 10% FBS культура без углекислого газа, культура при 28° или 21°

Клеточная форма: фибробласт

Условия замораживания: замораживание клеток без сыворотки крови

Технические характеристики: 1 × 10 ^ 6cells / T25 Культурные бутылки

Номер: GOY - 01X1912

Эмбриональные фибробласты зебры на основе pac2 тщательно оптимизированы командой, после длительных испытаний, этот продукт может поддерживать отличный рост протолегких макрофагов крыс.

Этот продукт уже содержит различные компоненты, необходимые для роста протолегких макрофагов у крыс, без добавления каких - либо компонентов, которые могут быть непосредственно использованы для культивирования протолегких макрофагов у крыс.

Меры предосторожности

Только для научных целей.

Некоторые компоненты в системе культивирования являются вредными для здоровья человека веществами, и, пожалуйста, не прикасайтесь к жидкостям системы культивирования и остаткам жидкости с системой культивирования внутри контейнера с открытой кожей; Эта часть вредных веществ имеет низкую концентрацию и опасность, и в случае контакта ее можно немедленно промыть проточной водой.

Восстановление

1) подогревать воду в водяной ванне с постоянной температурой до 37°С;

2) Подготовьте 15 - миллиметровую центробежную трубку, добавьте 5 - миллиметровую питательную среду, содержащую 10% FBS, и поместите ее в водяную ванну 37°C для подогрева;

3) Наденьте защитные очки, толстые шерстяные перчатки, выньте из резервуара с жидким азотом, чтобы оживить клетку, как можно скорее в котел с водяной ванней с постоянной температурой 37°C

Повторная температура качает охлаждающую трубку, чтобы увеличить скорость восстановления;

4) вдыхание клеток из расплавленной замороженной трубки в заранее подготовленную центрифужную трубку, смешивание, 1000rpm центрифуга 5 мин;

5) Подготовьте бутылку Т - 25, напишите название клетки, дату и добавьте 4 мл питательной среды;

6) После завершения центрифугирования отбросить верхнюю очистку, после того, как 1 мл питательной среды перевешивает клетки, перейти в Т - 25 клеточную культуру, перемешать и перейти

СO2 культивируется в инкубаторах.

Передача поколений (клеточная передача рекомендуется 1 - 2)

1) Когда клеточная конвергенция достигает более 85%, может быть проведена передача.

2) В шкафу биологической безопасности, откройте отверстие бутылки для культивирования и соберите питательную среду в бутылке;

3) После добавления 3 мл стерильного 1 × PBS в бутылку для культивирования, поместите бутылку горизонтально, чтобы PBS мог проникать на всю площадь на дне бутылки для культивирования и высасывать PBS;

4) Добавьте 1 мл пищеварительного раствора в бутылку и поместите 1 - 2 мин в инкубатор CO2 при температуре 37°C после погружения в дно;

5) После завершения инкубации под перевернутым микроскопом наблюдать, кружится ли клетка, и, если все переваривается, добавлять 2 мл питательной среды, содержащей 10% FBS, непосредственно в питательную бутылку, всасывая суспензию в 15 мл центробежной трубки;

Приготовьте стерильную 15 - миллиметровую центрифужную трубку и добавьте 2 - миллиметровую питательную среду, содержащую 10% FBS;

(2) вдыхание переваренных клеток в центробежную трубку и нейтрализация (избегайте вдувания); Добавьте 1 мл в ранее переваренную бутылку с культурой, чтобы продолжать переваривать около 2 мин, похлопайте бутылку с культурой и снимите около 95% клеток.

6) 1000rpm центрифуга 5min;

7) Подготовьте две новые бутылки Т - 25, каждая с добавлением 4 мл питательной среды.

8) После завершения центрифугирования, отбросив очищение, повторно подвешивая центробежные клетки с помощью 2 мл питательной среды, повторно подвешенные клетки передаются в 2 бутылки Т - 25, каждая по 1 мл;

9) Горизонтально поместить бутылку для культивирования, сотрясение смешано, поместить бутылку для культивирования в 37°C, 5% инкубатора CO2 для статической культуры.

Замораживание (замораживание клеток рекомендуется по одной на бутылку T25)

1) ~ 6) Ссылка на этапы передачи

7) После завершения центрифугирования, после удаления и очистки, осаждается 1 мл замороженной жидкости с тяжелыми суспензионными клетками, а затем переходит в 1,8 мл замороженной трубки;

8) Поместить охлаждающую трубку в программный охладитель, заполненный изопропиловым спиртом, а затем в холодильник с температурой 80°C на ночь;

9) На следующий день вынуть охлаждающую трубку из серийной коробки охлаждения, которая была завершена охлаждением, и как можно скорее перевести в резервуар с жидким азотом для хранения.

Рецепторы конечного продукта поздней гликолизации(AGER)Рекомбинантные белкиРекомбинантный рецептор, специфический для конечного продукта (AGER)

EPCAM Белок человекаРеорганизацияEpCAM / TROP-1 / TACSTD1белок

НРП1РеорганизацияНейропилин-1 / НРП1белок(ФК)метка) Белок

HA белок H1N1Рекомбинантный грипп АH1N1 (A/WSN/1933)ГемогенHA1 (гемаглутинин)белок

делатьРеорганизацияLALBA / Альфа-лактальбуминбелок(ФК)метка) Белок

Микрофаги крыс(GMCSF/CSF2)Реактор Английское название:Комплект ELISA GMCSF/CSF2

Аокринный фактор кератиноцитов мыши (KAF) ELISA Kit / амфирегулин (AR) ELISA KitЭндокринный фактор роговицы у мышей(КАФ)Реактор/Бициклин(AR)Реактор

Морфогенетические белки мыши, BMPsELISAKitОстеобразующие белки у мышей(БМП)Реактор96T/48TИмпортная разделка

CLIAKitforHumanpaxillin, PaxELISAKitПчелиный белок

Изотопы[γ32П]АТФКомплект реагентов для усиления микроспутников с маркировкой киназы20раз

ELISAKitPIAb-IgG/IgMКрысы0Антитела к липидомиолуИГГ/ИГМ

Мышиный трансфермент Мышиный трансфермент Тип спецификации:96T/48T Набор трансферментов для мышей, тип:96T/48TИсточник: Набор реагентов (импортная раздельная упаковка), продукт псевдоним: Набор реагентов для трансферментов мышей, Трансфермент для мышейЭйсаРеактор Условия сохранения:2 - 8℃ Срок годности:6Месяц.

Комплект для переноса ферментов на основе мышей Комплект для переноса ферментов на основе мышей Тип спецификации:96T/48T Набор для переноса ферментов на основе мышей, тип:96T/48TИсточник: Набор реагентов (импортная раздельная упаковка), продукт псевдоним: Набор реагентов для переноса ферментов на основе мышей, Трансфераза на основе мышейЭйсаРеактор Условия сохранения:2 - 8℃ Срок годности:6Месяц.

Набор реагентов для факторов роста кожи мышей Набор реагентов для факторов роста кожи мышей Тип спецификации:96T/48T Набор реагентов для факторов роста кожи мышей, модель:96T/48TИсточник: Набор реагентов (импортная упаковка), псевдоним продукта: Набор реагентов для факторов роста кожи мыши, фактор роста кожи мышиЭйсаРеактор Условия сохранения:2 - 8℃ Срок годности:6Месяц.

Набор для мышиных палочек Набор для мышиных палочек Тип спецификации:96T/48T Набор для мышей Bacillus Bacillus, модель:96T/48TИсточник: Набор реагентов (импортная раздельная упаковка), продукт псевдоним: Набор реагентов для мышиной палочки, мышиная палочкаЭйсаРеактор Условия сохранения:2 - 8℃ Срок годности:6Месяц.

Гексогеназа у мышей(HK) ELISAРеактор96T/48T

Комплект ELISA для сорбитольной дегидрогеназы человека (SDH)Дегидрогеназа человека(SDH)Реактор

Человеческая ДНАСвязывающий белок, DBPELISAKitчеловекДНКАссоциированные белки(ДБП)Реактор96T/48TИмпортная разделка

HumanAi-глюкопротеин210, GP210Человеческий антирибонуклеин210Антитела(gp210)Спецификации комплекта:96T/48T

Растительный гидроксилаза(лизилгидроксилаза)дозированный по методу активного колориметрического метода20раз

человеческий витамин АА,Сила тяги VaelisatчеловекА(ВА)Спецификации комплекта:96T/48T

PМатериальное антитело

Связанные адгезионные молекулы2Антитела

Эмбриональные фибробласты зебры pac2НРП1РеорганизацияНейропилин-1 / НРП1белок(ФК)метка) Белок

Рецепторы конечного продукта поздней гликолизации(AGER)Рекомбинантные белкиРекомбинантный рецептор, специфический для конечного продукта (AGER)

делатьРеорганизацияLALBA / Альфа-лактальбуминбелок(ФК)метка) Белок

EPCAM Белок человекаРеорганизацияEpCAM / TROP-1 / TACSTD1белок

HA белок H1N1Рекомбинантный грипп АH1N1 (A/WSN/1933)ГемогенHA1 (гемаглутинин)белок

Асептические операции ‌:Клеточная культура должна проводиться в стерильной среде, перед использованием ультрафиолетового облучения и стерилизации сверхчистого рабочего стола, а также регулярной очистки инкубаторов. Экспериментальные работники должны заменить комбинезоны, обувные чехлы, носить маски и перчатки.

• Стерилизация оборудования:Стеклянная посуда, металлическая посуда и т. Д. Можно использовать высоковольтную паровую стерилизацию, пластиковые изделия выбирают больше эпоксиэтана стерилизации или покупки стерилизованных продуктов.

Выбор реагентов ‌:Используемая питательная жидкость, сыворотка, буферная жидкость и другие реагенты должны быть стерильными, без загрязнения, перед использованием необходимо провести стерильное тестирование. Различные клетки имеют разные требования к составу питательной жидкости, и подходящую питательную жидкость следует выбирать по типу клетки.

• Условия культивирования:Большинство клеток млекопитающих пригодны для культивирования при температуре 37°C, а отклонение должно контролироваться на уровне ±0,5 °C. Цистерны должны поддерживать хорошую герметичность, регулярно проверять концентрацию и расход газа, а для культивирования клеток обычно требуется 5% CO2, чтобы поддерживать стабильность pH питательной жидкости. Влажность в инкубаторе должна быть около 95%.

АЕжедневные наблюдения:Каждый день под микроскопом наблюдаются изменения формы клеток, состояния роста и цвета питательной жидкости.

Регулярное тестирование ‌:Клетки регулярно проверяются на загрязнение, такое как микоплазма, бактерии и грибки.